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目的:研究表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤血管及淋巴管生成的影响,并探讨其作用机制,为临床乳腺癌的防治提供理论学基础。
方法:培养人乳腺癌MCF-7细胞,构建人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型。30只实验裸鼠随机分成五组,即生理盐水组、5-氟脲嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)组、高剂量20mg/kg EGCG组、中剂量10mg/kg EGCG组、低剂量5mg/kg EGCG组。待肿瘤体积约100 mm3开始用药,生理盐水对照组隔日腹腔注射生理盐水,其余各组隔日腹腔给药,药物干预3周。每隔两天测量移植瘤的长短径,绘制移植瘤体积生长曲线,处死裸鼠后称量瘤重,计算抑瘤率;观察瘤组织血管内皮生长因子A(Vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)和血管内皮生长因子C(Vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)的表达情况,CD34标记血管,淋巴管内皮细胞透明质酸受体1(Lymphatic vessel endothelial hyaluronanreceptor-1,LYVE-1)标记淋巴管,检测血管和淋巴管的密度及面积;Western blot检测移植瘤组织VEGF-C蛋白的表达情况。
结果:成功建立人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型。各治疗组移植瘤生长速度明显慢于盐水对照组,5mg/kg EGCG处理组平均瘤重0.85克,平均抑瘤率为13.32%,10mg/kg EGCG组平均瘤重0.59克,平均抑瘤率为33.58%,20mg/kgEGCG组平均瘤重0.51克,平均抑瘤率为42.59%,与生理盐水组差异均有显著性意义。免疫组化染色VEGF-C在20mg/kg EGCG处理组中的表达量明显低于生理盐水组和5-FU组,且VEGF-C的表达与EGCG成剂量依赖性;移植瘤周边淋巴管密度、面积在20mg/kg EGCG处理组中显著低于5-FU组和生理盐水组,差异有统计学意义。免疫组化染色VEGF-A在高中剂量EGCG组的表达量明显低于盐水对照组,差异有统计学意义。移植瘤内血管密度、面积在高中剂量EGCG处理组明显低于盐水对照组,差异有统计学意义。Western blot结果显示EGCG高剂量处理组VEGF-C蛋白明显低于生理盐水组,差异有统计学意义。
结论:EGCG可明显抑制人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的生长,EGCG可以抑制乳腺癌裸鼠移植瘤中VEGF-A和VEGF-C的表达,EGCG可以抑制血管及淋巴管的生成。