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[目的]茶树油是从茶树中提取的天然混合物,具有抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗过敏、增强免疫力等作用。近年来报道茶树油对多种肿瘤细胞的生长具有抑制作用,但其抗黑色素瘤作用及机制尚需进一步研究。本文从体外细胞培养和体内动物实验两个方面考察茶树油提取物不同配方抗B16F10黑色素瘤的活性,筛选出较优配方并初步研究其抗黑色素瘤作用机制,研究结果可为茶树油提取物抗肿瘤作用提供依据。[方法]体外细胞实验中,茶树油提取物6个配方分别以0.0125%、0.025%、0.05%、0.1%的浓度作用于B16F10黑色素瘤细胞,MTT法检测细胞活力。以对细胞活力的抑制作用筛选出较优配方;流式细胞术分析配方5对B16F10黑色素瘤细胞周期分布和凋亡的影响;Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和cleaved caspase-9表达。体内动物实验中,C57BL/6小鼠腋下皮下注射B16F10黑色素瘤细胞建立肿瘤模型,配方5或环磷酰胺瘤内注射,连续7天,PBS作为模型对照。称量小鼠体重、测量肿瘤长、短径计算肿瘤体积。试验结束时剥离肿瘤并称重;对肿瘤组织进行HE染色分析,Western blot和免疫组化分析肿瘤组织中凋亡蛋白cleaved caspase-3和/或cleaved caspase-9的表达。[结果]MTT检测结果表明不同配方茶树油在试验浓度范围内,均能有效抑制B16F10黑色素瘤细胞的生长,且有较明显的剂量-效应关系。0.025%浓度时,6个配方对细胞的抑制率约为30%～75%;配方5在0.0125%～0.05%浓度范围,细胞活力降低近60%。配方5对B16F10黑色素瘤细胞活力抑制效果最好、配方2次之、配方4优于其他3个配方。流式细胞术和Western blot结果表明,配方5可明显引起肿瘤细胞周期阻滞、促进凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的表达。小鼠移植瘤实验中,配方5和环磷酰胺处理组移植瘤的体积和重量显著小于PBS对照组,配方5能够抑制移植瘤生长。HE染色表明配方5和环磷酰胺处理组肿瘤细胞生长相对稀疏、核不规则;Western blot和免疫组化分析显示其瘤组织中cleaved caspase-3和/或cleaved caspase-9表达量显著增加。[结论]茶树油提取物在体内外均能有效抑制B16F10黑色素瘤细胞及其移植瘤的生长,其作用机制与通过线粒体途径诱导凋亡有关。