miRNA是一类不进行翻译的非编码RNA分子，长度约为19～24个碱基对（bp），主要与信使RNA（mRNA）的3′UTR结合。miRNA的主要功能是通过靶向mRNA进行降解或翻译抑制来调控基因表达。miRNA的种子序列与靶mRNA的3′UTR形成部分互补或完全互补，借此发挥其特有的基因抑制性作用。目前已经有越来越多的学者开始着手针对miRNA的研究。不同的miRNA可能在许多途径上表现出致癌或肿瘤抑制作用，这取决于他们的目标基因或作用的信号通路。miRNA不仅参与调控恶性肿瘤细胞的增殖，在肿瘤的侵袭转移中也发挥重要作用。因此，miRNA在非小细胞肺癌中的作用越来越受到关注。与不同类型癌症相关的miRNA包括致癌miRNA、抑癌miRNA和miRNA调控因子。既往研究表明miR-140-5p在多种肿瘤类型中发挥重要作用；然而，研究miR-140-5p表达与非小细胞肺癌患者的病情变化及预后的关系研究非常有限。因此，miR-140-5p在NSCLC中的具体作用还有待确定。
　　目的：
　　本实验通过检验 miR-140-5p在肺癌与癌旁组织中的表达差异，观察其低表达是否与肺癌相关。并探讨miR-140-5p能否调控YES1原癌基因的表达，进而影响细胞的增殖和凋亡，为肺癌的靶向治疗积累数据，提供新的研究思路。
　　方法：
　　通过RT-qPCR检验miR-140-5p在肺癌与癌旁组织中的表达差异，探讨miR-140-5p低表达是否与肺癌发生相关。在RPMI-1640完全培养基中培养肺癌A549细胞株，将A549细胞分为转染组、阴性对照组及NC组，转染组、阴性对照组分别转染miR-140-5p mimics、control mimics。转染48h后收集细胞，使用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。使用TargetScan等靶基因数据库预测miR-140-5p的基因靶点，确定YES1基因存在miR-140-5p的作用位点，将包含有靶位点的3′UTR序列进行基因合成，并设置阴性对照组，进行Western blot检测，检测YES1、Bcl-2、Bax和Caspase-3等细胞凋亡相关因子的表达水平，明确miR-140-5p是否可以通过作用于YES1基因而引起A549细胞凋亡。使用CCK-8试剂检测，明确miR-140-5p是否可以通过作用于YES1基因抑制A549细胞增殖。
　　结果：
　　通过荧光PCR技术对比肺癌与癌旁组织中miR-140-5p表达的差异，发现癌旁组织中miR-140-5p的表达水平远远高于肺癌组织（P<0.05）。使用流式细胞仪检测转染miR-140-5p mimics后的肺癌A549细胞的凋亡情况，证实miR-140-5p的过表达能够促进肺癌细胞的凋亡。TargetScan等靶基因数据库中预测YES1存在miR-140-5p的可能作用位点，将包含有靶位点的3′UTR序列进行基因合成，再通过荧光报告载体检测，证实YES1是miR-140-5p的靶基因。采用Western blot检测，研究转染miR-140-5p后的A549细胞中YES1、Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达情况，结果证实，与NC组相比，A549细胞中miR-140-5p过表达显著降低了YES1和Bcl-2在蛋白水平上的表达，同时mimics组Bax和Caspase-3的表达明显升高，同时CCK-8实验结果也证实了转染miR-140-5p后的细胞增殖能力减弱。上述结果提示，miR-140-5p靶向作用于YES1基因在体外影响A549细胞的凋亡与增殖。
　　结论:
　　1、 与癌旁组织相比，miR-140-5p 在肺癌组织中表达明显降低。
　　2、 miR-140-5p可靶向作用于YES1基因。
　　3、 miR-140-5p通过调节YES1基因表达影响A549细胞的凋亡与增殖。