【摘 要】
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目的:研究ADRM1在白血病细胞中的表达及其作用。方法:1.实时定量RT-PCR(q RT-PCR)及Western Blot方法分析白血病细胞中ADRM1 m RNA与蛋白表达水平;2.利用短发卡RNA(sh RNA)下
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目的:研究ADRM1在白血病细胞中的表达及其作用。方法:1.实时定量RT-PCR(q RT-PCR)及Western Blot方法分析白血病细胞中ADRM1 m RNA与蛋白表达水平;2.利用短发卡RNA(sh RNA)下调HL60白血病细胞ADRM1表达;q RT-PCR及Western Blot分析ADRM1 sh RNA的沉默效果;3.应用姬姆萨染色、生长曲线法、细胞集落形成实验、Transwell实验、流式细胞周期与凋亡检测、Western Blot观察NF-κB p65核转位等方法研究ADRM1下调后HL60生物学行为变化与分子机制。结果:1.ADRM1 m RNA在急性白血病细胞中表达上调(n=116);ADRM1 m RNA表达水平与白血病幼稚细胞比率成正相关,P<0.05;ADRM1蛋白在急性白血病细胞中普遍上调(n=16);2.利用sh RNA干扰成功下调HL60细胞ADRM1表达;3.姬姆萨染色显示ADRM1下调后HL60细胞形态未见显著差异;后续功能实验表明ADRM1下调显著抑制HL60细胞增殖(抑制率为48.82±12.58%)和集落形成,使细胞停滞在G0/G1期并诱发细胞凋亡,但对细胞迁移、侵袭能力则无显著影响;Western Blot检测显示ADRM1下调不影响NF-κB p65总蛋白和浆蛋白表达,但显著抑制其在核内表达。这说明ADRM1促进HL60细胞NF-κB p65蛋白核转位。结论:ADRM1在白血病细胞中高表达,ADRM1下调可能通过抑制NF-κB p65蛋白核转位,阻断NF-κB信号通路而导致细胞G0/G1期停滞并诱发细胞凋亡增多,导致HL60细胞增殖抑制。
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