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根据临床前资料,表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)和化疗药物有协同抗肿瘤作用。然而,多中心Ⅲ期随机临床试验显示,EGFR-TKIs联合化疗一线治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者并没有改善生存率。近年来关于EGFR-TKIs和化疗的序贯治疗的临床研究中取得了比单纯化疗较好的疗效,但选择先用哪个治疗疗效会更加目前不是很清楚。本实验不同次序给予EGFR-TKIs-吉非替尼和化疗药-多西他赛,通过检测不同EGFR基因型细胞PC-9、PC-9/G、A549的存活率、周期及凋亡,探索不同次序给药是否出现差异、以及出现差异的可能的机制,为临床序贯用药提供理论参考。吉非替尼和多西他赛按不同浓度梯度分别抑制三种细胞,MTT法检测PC-9、PC-9/G、A549的增殖,作图法计算出药物半数抑制浓度(IC50)；每种细胞实验均分为5组：对照组、吉非替尼组(G)、多西他赛组(D)、先用吉非替尼后用多西他赛组(G-D)、先用多西他赛后用吉非替尼组(D-G)；MTT法检测5组细胞的增殖,按公式计算细胞存活率；细胞凋亡试剂盒(Annexin V/PE)标记和细胞周期试剂盒(PI)染色,利用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期以及最后利用Multicycler 3.0软件分析细胞周期。得到如下结果：1.吉非替尼和多西他赛分别对三种细胞生长抑制作用呈浓度依赖性；2.三种细胞的不同次序给药组对抑制细胞的生长作用均强于单药组(P<0.05),D-G组较G-D组细胞存活率显著减少(P<0.05)；3.三种细胞的D-G组可使细胞阻滞在G2／M期,G-D组可使细胞阻滞在G0／G1期；4.PC-9和PC-9／G的G-D组减少D组诱导的细胞凋亡(P<0.05),D-G组比G-D组细胞凋亡率明显增多(P<0.05)；A549的G-D组与D组(P>0.05)或G-D组与D-G组均没有差异(P>0.05)。提示：1.先用多西他赛后用吉非替尼为最佳序贯给药方案；2.对EGFR突变型细胞来说,先用多西他赛后用吉非替尼的强效作用可能与抗增殖、细胞周期双重阻断以及促凋亡有关；对EGFR野生型细胞来说,先用多西他赛后用吉非替尼的强效作用可能与抗增殖和细胞周期双重阻断有关。