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研究目的:肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球癌症相关死亡的第四大最常见原因。HCC发病率居我国肿瘤总发病率第四位,每年约有38.3万患者死亡,HCC致死率居我国恶性肿瘤死亡率第三位,总生存率仅为36.9%。如何阻止早期HCC患者术后复发及肿瘤浸润性生长,或通过将晚期HCC患者用手术无法切除的肿瘤控制在局部以实现“带瘤生存”等方法来提高HCC患者生存期,是目前国内外研究的热点。探索肝癌发生发展分子机制以及寻找HCC治疗新策略和新方法,对HCC治疗具有重要意义。长非编码RNA(long-noncoding RNA,lnc RNA)癌症易感候选物15(cancer susceptibility candidate 15,CASC15)位于染色体6p22.3上,研究报道显示CASC15表达与肿瘤发生发展相关联,但其在不同组织类型肿瘤中功能并不一致。CASC15低表达与神经母细胞瘤患者预后不良高度相关,CASC15过表达可抑制白血病细胞增殖;但CASC15过表达是黑色素瘤患者发生肿瘤转移的独立危险因素。目前尚未见CASC15在HCC中的功能及其作用机制的研究报道,CASC15是否在HCC进展中发挥重要作用,其与HCC复发、转移与预后等的相关性有待我们去探究,其深入研究为HCC治疗策略提供新思路。研究内容及方法:选取三种转移能力依次递增的HCC细胞系,Huh7细胞、MHCC97L细胞和HCCLM3细胞,采用表达谱芯片技术检测lnc RNAs在不同转移能力HCC细胞系中表达情况,筛选出与HCC转移特性相关的差异表达lnc RNA CASC15,其表达谱芯片检测结果用实时定量PCR方法验证;其次分别采用实时定量PCR方法和RNA组织原位杂交方法检测HCC患者癌和癌旁组织标本中CASC15表达情况;单因素及多因素COX回归模型分析CASC15表达量与患者预后等临床病理资料之间的关联;采用Kaplan-Meier生存曲线分析探讨CASC15与HCC患者预后之间的关系。继而,我们构建稳定CASC15高表达和降表达HCC细胞系,体外划痕、迁移及侵袭等方法观察CASC15对HCC细胞迁移及侵袭能力的影响。采用裸鼠肝原位种植瘤模型观察CASC15高表达对HCC肝内转移能力的影响。结果与结论:本研究采用不同转移能力HCC细胞系表达谱芯片结果筛选出差异表达lnc RNA CASC15,其表达量随HCC细胞转移能力增强而明显降低,实时荧光定量PCR方法证实CASC15在转移能力低的Huh7细胞中表达量最高,在MHCC97L细胞中次之,在HCCLM3细胞最低;HCC临床组织RNA标本的实时定量PCR方法检测结果说明CASC15在HCC肿瘤组织中的表达量低于相应癌旁组织;临床组织切片RNA原位杂交检测结果亦显示HCC肿瘤组织中CASC15表达量低于癌旁组织;单因素多因素COX回归模型分析结果显示CASC15低表达水平是HCC患者预后不良的独立危险因素(P<0.05);生存分析结果说明HCC组织中CASC15高表达患者总生存期明显高于CASC15低表达患者(P<0.05)。体外实验结果显示CASC15高表达抑制HCC细胞迁移和侵袭能力,CASC15表达下调促进HCC细胞迁移和侵袭能力。小鼠体内实验结果亦显示,CASC15表达上调能明显抑制HCC肝内转移现象。综上所述,CASC15与HCC转移特性相关联,CASC15高表达抑制HCC转移能力,本研究结果为阐明lnc RNAs在肿瘤转移中的作用及抗HCC转移治疗提供了新的思路和实验室研究基础。