内障丸治疗青春期多囊卵巢综合征的实验研究

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目的:本实验运用光镜、HE染色、免疫组化技术,观察中药内障丸对多囊卵巢大鼠免疫学的影响,重点研究血清中肿瘤坏死因子(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)的表达情况,以期从细胞及分子水平揭示内障丸治疗青春期多囊卵巢综合征(PCOS)的作用机制,为临床应用提供理论依据。材料及方法:选用24日龄未成年雌性SD大鼠60只,随机分为病理模型组50只和正常对照组10只。应用皮下埋植左炔诺孕酮硅胶棒联合皮下注射HCG法建立多囊卵巢动物模型。造模成功后给予内障丸高、中、低剂量灌胃30天,对照组给予同容积蒸馏水灌胃。于24日龄、36日龄、67日龄测体重,比较造模前后、用药前后大鼠体重。大鼠取血后,收集血清样品,放免法测定血清中TNF-α、IL-6的含量。数据处理:实验数据应用SPSS14.0统计软件进行处理,以P=0.05作为差异有无统计学意义的检验标准。结果:大鼠体重:内障丸高、中、低剂量组大鼠用药前体重与模型组比较无显著性差异,用药后均明显低于模型组。卵巢大体解剖观察结果:造模后,模型组大鼠卵巢重量大于正常对照组(P均<<0.01),卵巢体积增大,卵巢表面较苍白,见较多囊状扩张的卵泡。内障丸治疗后,卵巢色泽红润,高剂量组卵巢重量较模型组(67日龄)明显降低(P<0.05)。卵巢形态学:造模后模型组囊状扩张卵泡比例明显增加,囊状扩张卵泡内卵母细胞消失,颗粒细胞层数减少,排列疏松,颗粒细胞层厚度较正常对照组明显变薄,P<0.01,泡膜细胞层厚度明显增厚,P<0.05,内外卵泡膜细胞层分层明显。内障丸治疗后高、中、低剂量组囊状卵泡比例均明显降低,P<0.01,其中低剂量组颗粒细胞层数较模型对照组明显增加,形态完整,排列整齐,泡膜细胞层明显变薄,黄体组织数量明显增多,P<0.05。血清TNF-α水平测定结果:造模后,模型组显著高于正常对照组(P<0.01);经内障丸治疗后,治疗高、中剂量组显著低于67日龄模型组(P<0.01);治疗低剂量组显著低于67日龄模型组(P<0.05):高剂量组与正常对照组比较无显著差异(P>0.05)。血清IL-6水平测定结果:造模后,模型组显著高于正常对照组(P<0.01);经内障丸治疗后,治疗高、中剂量组显著低于67日龄模型组(P<0.01);治疗低剂量组显著低于67日龄模型组(P<0.05)。结论:1.皮埋左旋18—甲基炔诺酮联合人绒毛膜促性腺激素(HCG)诱导SD幼年雌性大鼠PCOS动物模型卵巢病理改变及血免疫因子改变与PCOS病人相似。2.内障丸可以改善PCO大鼠卵巢形态学的异常,可能因此而促使卵巢排卵。3.PCO大鼠模型血清中编码炎症的免疫细胞因子IL-6和TNF-α明显升高,提示PCOS与免疫学关系密切,可能是慢性亚临床炎症的一种状态。4.内障丸可以降低PCO大鼠血清中编码炎症的细胞因子IL-6和TNF-α水平,提示内障丸可以改善PCOS的免疫内环境。
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