不同时间窗溶栓治疗后大鼠脑内MMP-9的表达研究

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目的:研究脑梗死和糖尿病合并脑梗死的大鼠在不同时间窗使用rt-PA溶栓治疗后的疗效,以及探讨脑缺血区MMP-9的表达上调与出血性转化之间的关系。方法:健康成年雄性wistar大鼠120只,体重约200-250g,随机分为单纯脑梗死组40只(CI)、糖尿病脑梗死组40只(DM+CI)、假手术组40只,每组再均等随机分为2h(20只)和4h(20只)组,CI组和DM+CI组分别在2h、4h时间点给予rt-PA溶栓,假手术组在2h、4h时间点给予生理盐水,所有大鼠均在溶栓24h后观察,并在每组中随机抽取6只行脑组织含水量计算,6只行伊文思蓝(EB)测定血脑屏障通透性,6只行免疫组织化学法测定MMP-9的表达。采用高糖高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌素,建立2型糖尿病大鼠模型,选择成模鼠进一步行自体血栓法建立大鼠脑梗死模型。根据Longa-bederson评分法将>0分且<5分者入组。各组数据均使用SPSS13.0统计软件进行数据分析,定量资料组内差异以均数±标准差表示,多个样本资料的比较方差齐者采用方差分析,方差不齐者采用Kruskal-Wallis检验,多个样本间的两两比较采用LSD检验。结果:1、干湿重法测量脑含水量显示,CI组和DM+CI组较假手术组相比,脑含水量明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01);DM+CI4h组与单纯CI4h组相比,脑含水量明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。2、伊文思蓝法测定血脑屏障通透性显示,CI组和DM+CI组与假手术组相比,血脑屏障的通透性增加,通过血脑屏障的EB含量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);DM+CI4h组与单纯CI4h组相比,EB含量显著增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。3、免疫组化显示,CI组和DM+CI组与假手术组相比,MMP-9的表达均有所增加,且具有统计学意义(P<0.01);DM+CI4h组与单纯CI4h组相比,MMP-9的表达显著增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:1、大鼠脑梗死后脑组织含水量增加,脑水肿;血脑屏障破坏,通透性增加;2、糖尿病大鼠脑梗死后较单纯脑梗死大鼠脑水肿更为明显,血脑屏障破坏更为严重。3、rt-PA对于大鼠脑梗死后急性期溶栓治疗有效,但对于合并糖尿病的脑梗死大鼠,溶栓治疗时间窗应缩小(<3h)。4、糖尿病脑梗死大鼠由于溶栓治疗后脑水肿、血脑屏障破坏更为严重,可使溶栓后出血性转化的发生率提高,这可能是通过上调脑缺血区MMP-9的表达进一步降解基底膜、破坏血脑屏障来实现的。
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