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目的:探讨蝮蛇毒血小板抑制因子(platelet inhibitor from Askitrodon halys venom,AHV-PI)对心肌缺血/再灌注损伤大鼠血小板活化的抑制作用及其机制。方法:雄性SD大鼠36只,随机分成正常对照组(NC组),心肌缺血/再灌损伤模型组(I/R组),AHV-PI干预组和BN52021阳性对照组(4mg/kg),其中AHV-PI干预组分为低(0.05mg/kg)、中(0.1mg/kg)、高(0.2mg/kg)三个剂量组,共6个实验组,每组6只。通过结扎大鼠冠状动脉左前降支30min,复灌2h,建立大鼠心肌缺血/再灌注损伤(Myocardial Ischemia reperfusion injury,MIRI)模型,AHV-PI干预组和BN52021阳性对照组均在结扎左前降支后立即腹腔注射相应体积药物,正常对照组不复制模型,仅注射相同体积生理盐水。术中大鼠连接Ⅱ导联心电图,观察大鼠心肌缺血/再灌注的ST段变化,结扎左前降支前、后利用散斑成像仪观察心脏表面血流状况,术后TTC染色检测心肌梗死程度,HE染色观察心肌形态学改变,颈总动脉取血,采用四通道血凝仪测定凝血功能变化,比色法测定血清中肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活力,比浊法检测血小板聚集率,ELISA方法检测血浆中血小板活化因子(Platelet-Activating Factor,PAF)含量和血小板中钙离子水平。结果:1.AHV-PI减轻缺血/再灌注大鼠心肌损伤。I/R组心电图ST段明显抬高,同时期的AHV-PI中、高剂量组ST段明显回落(P<0.01)。HE染色I/R组心肌细胞排列紊乱,出现大量收缩带,心肌纤维波浪状改变,AHV-PI中剂量组和AHV-PI高剂量组可以明显改善心肌细胞紊乱情况。TTC染色I/R组心肌梗死面积明显增加,AHV-PI中剂量组、AHV-PI高剂量组可明显降低I/R引起的心肌梗死面积增加(P<0.01)。AHV-PI高剂量组相比I/R组,可以明显降低LDH和CK的活性(P<0.01)。2.AHV-PI明显抑制缺血/再灌注大鼠血小板活化的增强。AHV-PI中剂量组、AHV-PI高剂量组可以显著抑制I/R引起的血小板聚集率明显升高(P<0.01),延长APTT、PT、TT时间(P<0.05),降低FIB含量的增加(P<0.05)。3.AHV-PI降低缺血/再灌注大鼠中PAF的增加。I/R组PAF含量显著上升(P<0.01),AHV-PI中剂量组和AHV-PI高剂量组的PAF含量与I/R组相比明显减低(P<0.01)。4.AHV-PI抑制缺血/再灌注大鼠血小板中钙离子的增加。I/R组血小板胞浆内钙离子水平明显增加(P<0.01),AHV-PI中剂量组和AHV-PI高剂量组中钙离子可以显著降低I/R引起的钙离子升高(P<0.05)。结论:1.心肌缺血/再灌注大鼠血小板活化因子释放增加是引起心肌损伤的重要因素之一。2.AHV-PI可以通过抑制PAF分泌和释放,降低血小板胞浆内的钙离子水平,减轻再灌注大鼠的心肌损伤。