【摘 要】
：
随着社会的发展和人们生活水平的提高,人们对于保健有了更加深入的了解,保健食品的市场需求量也越来越大,然而保健食品的制假掺假、非法添加等问题层出不穷。为解决这些问题,科研工作者们开发了一系列检测方法。其中,基于单分子光漂白(Single molecule photobleaching,SMPB)技术的生物传感方法是一种高效、灵敏、不需要专业的技术人员操作复杂的仪器的新方法,收到了广泛关注。核酸适体(
论文部分内容阅读
随着社会的发展和人们生活水平的提高,人们对于保健有了更加深入的了解,保健食品的市场需求量也越来越大,然而保健食品的制假掺假、非法添加等问题层出不穷。为解决这些问题,科研工作者们开发了一系列检测方法。其中,基于单分子光漂白(Single molecule photobleaching,SMPB)技术的生物传感方法是一种高效、灵敏、不需要专业的技术人员操作复杂的仪器的新方法,收到了广泛关注。核酸适体(Aptamer)是一类能特异性识别目标物的寡核苷酸。“裂开型”核酸适体(Split aptamer)是将一条完整的核酸适体在合适的位置裂开成两条,共同识别目标物,有利于传感方法的设计。本文基于腺苷与茶碱的“裂开型”核酸适体,设计多个重复适体探针识别腺苷(Adenosine)和茶碱(Theophylline),利用单荧光分子漂白考查荧光探针的聚合度(Degree of aggregation,DOA),开发高灵敏检测腺苷与茶碱的新方法。主要结果如下:(1)单色荧光分子光漂白计数检测腺苷的新方法本工作,我们设计一种改进的“裂开型”核酸适体探针,用于识别溶液中单个腺苷分子,构建了一种基于单分子光漂白的超敏检测腺苷的方法。将“裂开型”核酸适体中的一条短链DNA标记一分子染料,另一条核酸适体片段被延长具有多个可识别位点,同时标记上一分子染料。在腺苷存在的情况下,短链核酸适体探针会特异性地结合长链适配体上,导致了一个依赖于浓度的自聚集过程。在单分子光漂白实验的基础上,准确地测定了短链DNA探针在长链适配体上的聚合度。通过对不同靶浓度下的DOA进行统计分析,建立了DOA与靶分子浓度(如腺苷)之间明确的曲线关系。检测限(Limit of detection,LOD)为44.5 pM,低于最近报道的荧光分析结果。由于灵敏度高、选择性好,本传感策略将在复杂环境下的生物分子分析中得到广泛的应用。(2)双色荧光分子共定位光漂白计数检测茶碱的新方法RNA类核酸适体易酶解等特点,不适用构建具有多个识别位点(>3)的片段,而利用“链霉亲和素-生物素(Streptavidin-Biotin)”反应模型可以解决这个问题。本工作,首先在一条“裂开型”核酸适体的一端修饰荧光染料cy5(cy5-probe1),再利用具有两个识别位点茶碱的“裂开型”核酸适体探针的一端修饰生物素,另一端修饰荧光染料fam,与链霉亲和素结合形成具有8个可识别位点的适配体探针复合物(SA-probe2-fam)。当茶碱存在时,cy5-probe1与SA-probe2-fam结合,引起双色荧光染料聚集通过共定位的方法确定特异性识别的荧光斑点(cy5),而cy5的聚合程度代表目标物的浓度。统计分析不同茶碱浓度下cy5的DOA构建DOA与茶碱浓度之间的曲线关系,其检测限为92.1 pM,能够满足高灵敏检测茶碱的需要。同时,考察了该方法在溶液中的回收率以及血清中的回收率,范围分别在99.43~100.36%和96.86~98.75%,本方法在水样品及血清样品有较好的回收率,能够进行广泛应用。
其他文献
枇杷是我国东南部的特色水果,在采收和运输中极易遭受病原菌的侵染,从而导致果实腐烂。大量文献证实拮抗酵母菌能够有效防治果蔬采后病害。本课题筛到一株能有效抑制枇杷灰斑
车辆自适应巡航控制(Adaptive cruise control,ACC)系统是车辆高级辅助驾驶系统的重要组成部分,通过控制节气门开度和制动压力自动调整车速,从而有效减少驾驶员负担、降低驾驶员误操作概率、提高驾驶安全性。在ACC系统中,前车加减速具有主观性与不确定性,通过预测前车加速度状态,本车能提前做好加减速的准备,避免不必要的急加减速,从而可以提高乘车舒适性,减少燃油消耗,改善经济性能。因此
柴北缘地处青藏高原东北缘,位于柴达木地块以北,祁连地块以南,构造-岩浆活动强烈,是我国中央造山带的重要组成部分。柴北缘超高压碰撞带目前已被确认为是一个典型的大陆深俯冲碰撞造山带,本文通过对柴北缘古生代花岗质岩石详细的岩相学、年代学、岩石地球化学和锆石Hf同位素研究,确定了多期花岗质岩浆的形成时代,探讨了花岗质岩浆的成因及形成的构造环境。柴北缘古生代花岗质岩石主要为二长花岗岩、花岗闪长岩和石英闪长岩
本文以马铃薯全粉、大米粉为主要原料,通过添加玉米粉、刺葡萄皮渣、蔗糖等辅料生产一种新型挤压膨化食品。使刺葡萄皮渣得到充分利用,其经济附加值得到提高。通过研究不同干燥条件对刺葡萄皮渣干燥时间与品质的影响,确定刺葡萄皮渣最佳干燥条件,并采用双螺杆挤压膨化技术,研究不同工艺配方及加工参数对挤压膨化产品品质的影响,主要研究结论如下:(1)经测定刺葡萄皮渣含水量为69.91%,将刺葡萄皮渣水分含量小于或等于
永磁同步电机具有尺寸小,结构简单,功率密度高,转矩脉动小以及在高精度控制上可实现出色的工作效率等优点,因此,越来越多地运用于工业制造、航天航空、家用电器等领域。随着近年来能源与环境资源的日趋紧张,节能环保已经成为国家发展基本策略,新能源电动汽车是今后汽车工业的重要发展趋势。因此,研究永磁同步电机的高性能控制策略是国内外电机控制领域的研究热点。其中,无差拍预测控制方法因其具有快速的动态性能、开关频率
枯草芽孢杆菌作为有益微生物,其产生的抗菌物质大多为低分子抗菌肽(Lipopeptides)。抗菌肽作为一种天然新型抗生素,具有抗药性、低毒、抗菌谱广、热稳定性高、生物可降解等优点。另一方面,由黄曲霉菌所产生的黄曲霉毒素是迄今为止发现的致癌性最强的天然污染物,目前使用物理、化学等方法来抑制黄曲霉的生长,其效果并不理想且成本较高。因此,利用生物防治的方法去除和抑制霉菌,成为当前国内外的研究热点。为了获
近年来,人们对平衡数进行了广泛的研究.基于平衡数(列),我们构造了平衡多项式并且对其性质进行了研究.我们发现,平衡多项式与切比雪夫多项式具有密切联系.各种形式的多项式求
粗毛牛膝菊(Galinsoga quadriradiata Ruiz et Pav.),隶属菊科牛膝菊属,已入侵我国多个省市,对入侵区的农业生产以及生态环境造成较大威胁。2018年于内蒙古自治区呼和浩特市发现,但在本区、市的相关研究尚属空白。本文以粗毛牛膝菊为研究对象,首先调查其在呼和浩特市的入侵分布范围、生境类型、物候特性及种子萌发特性;在此基础上,采用样方法及数理统计法分析粗毛牛膝菊入侵对呼和
油菜素内酯(BR)是一种甾醇类植物激素,在植物的胚胎发育、维管系统分化、细胞分裂、植物抗逆性等方面具有重要调节作用。为探究不同浓度油菜素内酯在地上部分喷施、根系灌浇处理方式下对蒙古栎(Quercus mongolica)幼苗木质部发育的影响及调控作用,首先以2个月蒙古栎幼苗为研究对象,使用不同浓度的BR地上部分喷施(0、0.01、0.1、1、10 mg/mL)、根系灌浇(0、0.05、0.5、5
目的初步探究线粒体靶向肽SS31对ARPE-19细胞的线粒体功能及凋亡的保护作用。方法用不同浓度的H_2O_2(0,100,150,200,250,300,500μmol/L)处理ARPE-19细胞24h,用MTT法检测细胞活性并选择最适浓度建立氧化损伤模型,再用不同浓度的SS31(10nM,100nM,1μmol/L)预处理细胞2h,通过MTT法测定细胞活力并选择SS31的最佳保护浓度。在倒置相