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目的:体外研究表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)抑制剂吉非替尼(Gefitinib)和雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,mTOR)抑制剂依维莫司(Everolimus)在gefitinib耐药鼻咽癌细胞中联合作用的效果及机制。方法:MTT法测定单药及联合用药对人鼻咽癌细胞株HONE1的增殖抑制;流式细胞术检测药物单独或联合作用于HONE1细胞株48h、72h后,各组细胞凋亡及周期分布的改变;Western Blot检测单药及联合用药48h后,HONE1细胞中磷酸化AKT(Phospho-AKT,p-AKT)和磷酸化S6K(Phospho-S6K,p-S6K)表达水平的变化。结果:MTT法结果显示gefitinib和everolimus对HONE1细胞的生长抑制均呈剂量依赖性,并由此计算出,gefitinib的IC50为17.92μmol/L,everolimus的IC50为2.46nmol/L,但二者的联合作用并没有表现出明显的协同效应(P>0.05);流式细胞术显示gefitinib及everolimus作用于HONE1细胞时,可诱导凋亡,引起G0/G1期细胞阻滞,两种作用均具有时间依赖性,而二者联合的效果并未表现出明显的优势(P>0.05);Western Blot显示gefitinib对p-AKT抑制作用不明显,everolimus可下调p-S6K的表达,但同时上调了p-AKT的表达,联合用药对p-S6K和p-AKT表达的抑制作用并不明显强于单药。结论:mTOR抑制剂everolimus并不能逆转gefitinib耐药鼻咽癌细胞株HONE1的耐药性,两者联合的效果在鼻咽癌细胞中没有明显优势,EGFR/AKT信号通路与mTOR信号通路的关系及其在鼻咽癌细胞中的作用机制有待进一步研究。