本研究从E.coli DH5a/pET5a-mph出发,PCR扩增出甲基对硫磷水解酶MPH结构基因,将其克隆进宿主大肠杆菌系统E.coli BL21(DE3)中表达,获得E.coli BL21 (DE3)/pET20b(+)-mph重组系统,经金属螯合一步亲和纯化后,即得纯度在90%以上的目的蛋白,从而发展了一种方便、快速、高效生产和纯化甲基对硫磷水解酶的方法。通过采用易错PCR的方法,在大肠杆菌系统中,对MPH进行了酶活力筛选研究。经一轮易错PCR,产生了一个库容量约为10800的易错PCR突变体库,经酶活测定后,筛选得到2株具有高活力的突变株A7(R41H)和E6(R49P／G117D),其对底物甲基对硫磷MP催化活性分别是野生型的约2倍和3倍。本研究同时还以甲基对硫磷水解酶MPH为识别元件,对pH值敏感的E2GFP为换能元件构建了一个检测有机磷农药的荧光生物分子传感器E2GFP-MPH。为了进一步提高该生物传感器的检测灵敏度,将酵母淀粉样蛋白Sup351-61的基因与E2GFP-MPH融合,得到一种能自组装成蛋白纳米线的生物传感器Sup351-61-E2GFP-MPH。实验表明,此纳米线生物传感器的检测灵敏度在荧光生物分子传感器E2GFP-MPH的基础上提高了约10,000倍,对甲基对硫磷的检测下限为1pmol/mL。