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目的:研究体外循环期间常温血脱中性粒细胞心脏停搏液微流量连续灌注对心肌的保护作用。1978年Follete及其同事提议采用温血心脏停搏液至今,对这一心肌保护的方法一直在不断完善。由于输血技术进展证实中性粒细胞介导的炎症反应可造成组织炎性损伤。因此,本研究通过应用中性粒细胞过滤器制成脱中性粒细胞心脏停搏液,选择反映心肌损伤敏感度较高的心肌肌钙蛋白I(cTnI)、细胞间粘附分子1(ICAM-1),及选择反映脂质过氧化程度的指标丙二醛(MDA),研究中性粒细胞与内皮细胞在心肌缺血再灌中相互作用。 方法:临床随机选取ASA(美国麻醉医师协会)Ⅱ-Ⅲ级,主动脉阻断时间在40分钟和体外循环时间在60分钟以上的风湿性心脏瓣膜病人20例。随机分为实验组和对照组(每组10例)。除实验组在温血连灌通路上加用中性粒细胞滤器(LDF)脱去中性粒细胞,制成脱中性粒细胞温血心脏停搏液外,其它术中处理两组均相同。术中在监测病人血流动力学的前提下,两组分别于体外循环前(T1)、主动脉阻断后30min(T2)、主动脉开放后30min(T3)、60min(T4)、120min(T5)分别采集肝素抗凝冠状静脉窦血和温血连灌通路中血液检测①中性粒细胞过滤器前后血细胞计数的变化;②采集冠状静脉窦血浆标本用硫代巴比妥酸显色法检测MDA的含量;③用酶联免疫吸附法检测血浆ICAM-1和的cTnI含量。统计数据用均数±标准差((?)±S)表示,采用SPSS(10.0)统计软件包处理,以α=0.05为显著性检验标准。郑州大学2003届硕士毕业论文脱中性粒细胞温血心脏停搏液心肌保护临床研究结果:1.一般资料:两组病人年龄、体重、升主动脉阻断时间、体外循环时间、手术时间及AsA分级差异均无显著性(P>0.05)。2.血浆心肌肌钙蛋I(cTnl)水平的变化:两组病人在CPB前cThl含量组间差异无显著性(0 .188士0.028 vs 0.176士0.034“留l,P>0.05):而在主动脉阻断后各时间点两.组间差异显著,对照组cTul值高于实验组(P<0 .05)。两组主动脉阻断后各时间点血清eTnl含量分别为(0.421士0.040 vs 0.471士0.535卜Lg/l,0.777士0.036 vs 0.817士0.044林9/1,0.862土0.073 vs 0.943士0.775林9/1,0.563士o,037 vs 0.617士0.059卜到l,P>0.05)。组内相比,两组病人主动脉阻断及开放后各时间点cTnl值均明显高于体外循环前cTnl值(P<0 .05)。3.细胞间粘附分子1(I CAM一l)水平的变化:两组病人在cPB前及主动脉阻断30min时ICAM一1含量组间差异无显著性,实验组及对照组体外循环前及主动脉阻断后3Omin时ICAM一l分别为(141.03土16.68v、146.37士15.64 ng/ml,P>005;235.42士12.34 vs 238.21士12.18 ng/nll,P>0.05)。而在主动脉开放后各时间点,组间差异具有显著性(P<0.05),对照组高于实验组,尤其在主动脉开放后60nlin(T4)时组间差异尤为显著(P<0.01)。T4时间点两组病人ICAM一1值分别为(340.53士15.58v、365.“士22.%ng/nll)。对照组主动脉阻断及开放后各时间点IcAM一1值分别为 (238.21士12.18,333.35士31.11,365.66士22.96,277.92士28.62ng/ml)、均较术前146.37士15.64 ng/ml为高,差异显著(p<0.01)。实验组主动脉开放后120min时ICAM一l值与CPB前相比差异明显(245.29士24.11 vs 141.03士16.68ng/mlP<0.01),但与主动脉阻断后3omin时xCAM一l值相比无显著差异(245.29土24一1 vs 235.42士12.34ng/m1P>0.05)。4.而浆MDA水平的变化:两组病人在休外循环前及土动脉阻断301111,1时MDA的含量组间差异无显著性(5.76士0.56 nrnol/ml vs 5.39士0.57 nmol/mlP>0.05;5.97士0.57 ·2-郑州大学2003届硕士毕业论文脱中性粒细胞温血心脏停搏液心肌保护临床研究nlnol/ml vs 5 .94士O.57nlnol/m IP>0.05),而在主动脉开放后各时间点组间差异具有显著性(P<0.05),对照组高于实验组。两组主动脉开放后时间点的MDA含量分别为 (7 .27士0.64 1111101/ml vs7.95士0.54 nnlol/mlP<0.05、8.47士0.89 nnlol/m 1 vs 9.69士1.06nmol/mlP<0.05、5.6肚0.58 nmol/ml 0 6.26士0.74 nmol/ml,P>0.05)。组内比较,两组在体外循环前及主动脉阻断30min时血浆MDA均无差异(P>0.05)。实验组主动脉开放后120min时MDA已恢复正常与体外循环前及主动脉阻断 30min时血浆MDA均无差异(P>0.05)。而对照组主动脉开放后120min时MDA未恢复正常与体外循环前及主动脉阻断3Omin时血浆MDA均具有显著性(P<0.01)。结论: 本实验研究证实,中性粒细胞(PMN)可通过产生氧自由基(OFR)或释放蛋白水解酶直接激活补体,有助于PMN从微循环渗出并聚集在心肌组织中产生心肌毒性作用,而血清cTn一I可反映心肌早期损伤程度,故主动脉阻断及开放后各时间点实验组血清cTn一工明显低于对照组,说明脱中性粒细胞温血心脏停搏液微流量灌注可以减轻心肌缺血一再灌损伤,有利于心肌保护。 主动脉开放后各时间点工CAM一含量高于体外循环前,说明心肌缺血再灌注时内皮细胞的ICAM且产生明显增高。而脱除心脏停搏液中的中性粒细胞后,工CAM一?