【摘 要】
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目的:通过检测HSP90β基因在白血病HL60细胞株及其耐药的HL60/ATRA细胞中的表达差异,探讨HSP90β基因在ATRA相关多药耐药性发生中的作用。方法:采用少量、多次、递增、反复AT
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目的:通过检测HSP90β基因在白血病HL60细胞株及其耐药的HL60/ATRA细胞中的表达差异,探讨HSP90β基因在ATRA相关多药耐药性发生中的作用。方法:采用少量、多次、递增、反复ATRA体外培养的方法建立HL60/ATRA耐药细胞株;用MTT法和流式细胞检测技术(FCM),分别检测HL60和HL60/ATRA细胞的增殖及细胞周期;RT-PCR、Western blot法检测HSP90β基因在HL60及HL60/ATRA细胞中的表达;通过MTT法检测HL60和HL60/ATRA细胞对常用化疗药物(VCR、CTX、VP-16、ADM)敏感性。结果:成功构建了白血病HL60/ATRA耐药细胞株;在mRNA和蛋白两个水平均检测到HSP90β,在耐药株HL60/ATRA中的表达较HL60显著增高(P<0.01);细胞周期和增殖实验结果显示,HL60细胞和HL60/ATRA细胞均增殖良好,没有统计学差异(P>0.05);药物敏感实验结果显示,HL60/ATRA细胞对VCR、CTX、ADM、VP-16的耐药倍数分别为10.74、5.51、4.01、3.24。结论:ATRA能够诱导HL60细胞中HSP90β高表达,经ATRA诱导后的HL60/ATRA细胞增殖良好,且对抗癌药物的敏感性显著降低、耐药性增高,这提示HSP90β可能在ATRA相关多药耐药性的发生过程中发挥着重要作用。
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