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目的：构建重组腺病毒pLP-Ad-ES，并对其进行鉴定、包装；用卵巢癌HO-8910细胞系接种于裸鼠皮下，建立移植瘤模型；用重组腺病毒pLP-Ad-ES联合化疗药物顺铂，分别作用于卵巢癌HO-8910细胞及裸鼠移植瘤，观察其对肿瘤的作用；探讨其与VEGF、MMP-2的关系；探讨原子力显微镜(AFM)在卵巢癌中的应用。
方法：(1)采用RT-PCR法及PCR等方法扩增鼠Endostatin，克隆表达于相应载体内，并对其进行鉴定、扩增、及质粒纯化、定量：重组腺病毒pLP-AD-ES；采用人胚肾HEK-293T细胞对腺病毒进行包装。(2)利用光镜、电镜观察卵巢癌HO-8910细胞形态；采用RT-PCR、Western-blotting、TUNEL、FACS检测等方法观察经pLP-AD-ES作用后卵巢癌HO-8910细胞的变化。(3)应用免疫组化、RT-PCR等方法观察pLP-AD-ES、pLP-AD-ES+顺铂(DDP)对裸鼠移植瘤的影响及VEGF、MMP-2、Endostatin的表达。(4)应用AFM观察HO-8910细胞形貌。
结果：(1)成功构建了携带有内皮抑素基因的重组腺病毒——pLP-Ad-ES；(2)pLP-Ad-ES能够抑制卵巢癌细胞HO-8910的增殖(P<0.01)，并且能够促进细胞凋亡，存在时间．剂量．依赖关系；(3)pLP-Ad-ES、pLP-AD-ES+DDP，能够抑制裸鼠移植瘤的生长，有明显的抑瘤作用(P<0.05)；(4)经腺病毒作用后，裸鼠移植瘤中MMP-2、VEGF呈现低表达、Endostatin呈现高表达；(5)AFM下，高、低转移组卵巢癌细胞周围的纤维变化不同，药物处理后的细胞的形态发生变化，符合其相应的生物学功能。
结论：pLP-Ad-ES能够抑制卵巢癌肿瘤细胞，诱导凋亡；pLP-Ad-ES能够抑制卵巢癌裸鼠移植瘤的生长；pLP-Ad-ES能够抑制VEGF、MMP-2的表达，增强Endostatin的表达，提示内皮抑素的作用机制可能与抑制血管生成和调节基质金属蛋白酶有关；AFM可以用于观察卵巢癌肿瘤细胞的超微结构，并且可以进行纳米机械特性分析，从而解释其生物学行为。