本研究以体外培养的人宫颈癌细胞系——HeLa细胞为对象,利用RNAi技术沉默细胞中人端粒酶催化亚单位(hTERT)基因,观察其对HeLa细胞生物学行为的影响并探讨其可能的作用机制。体外转录法成功筛选出针对hTERT基因的有效干扰shRNA序列,构建到pGCsi表达质粒中(pGCsi-hTERT),质粒介导的体内转录成功获得具有明显hTERT沉默效果的稳定转染HeLa细胞阳性克隆。瞬时转染和pGCsi-hTERT阳性克隆细胞株体外实验均显示RNA干涉hTERT基因表达后,明显的改变了HeLa细胞生物学行为,表现为降低了细胞增殖能力,诱导细胞凋亡的增加,使细胞在FN基质上的黏着、铺展能力,细胞迁移速度及穿过Matrigel胶的侵袭能力均不同程度的降低,裸鼠体内成实体肿瘤减小。首次发现RNA干涉hTERT基因后,使细胞的内质网扩张、细胞对外钙的反应明显下降提示可能有内钙储存的增加。RNA沉默hTERT基因表达后,细胞骨架丝蛋白的表达明显减低,细胞外基质纤维粘连蛋白(FN)的聚合显著减慢,同时发现细胞内磷酸化AKT的明显减少,提示在RNA干涉hTERT基因表达引起HeLa细胞生物学行为改变时所引发的细胞内信号的传导与AKT信号转导通路相关。本研究为以端粒酶为靶点的肿瘤发生机制和肿瘤治疗学研究提供和填充了新的理论基础。