【摘 要】
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采用培养甘蓝型油菜带柄子叶和上胚轴的方法,进行了建立油菜外植体高效植株再生体系的研究,将带柄子叶接种于含0~7mg/ 6-苄基腺嘌呤(6-BA)的MS培养基和含1mg/L 6-BA,0.1~1.0m
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采用培养甘蓝型油菜带柄子叶和上胚轴的方法,进行了建立油菜外植体高效植株再生体系的研究,将带柄子叶接种于含0~7mg/ 6-苄基腺嘌呤(6-BA)的MS培养基和含1mg/L 6-BA,0.1~1.0mg/L萘乙酸(NAA)的MS培养基中.利用上述油菜外植体高效植株再生体系,分化出的幼芽转至含kan50mg/L的诱根培养基中长根后能获得完整的油菜再生工程植株.以质粒pBLGC为模板,分别以复性温度为50℃,52℃,54℃进行PCR扩增,复性温度为52℃的条件下,以抗kan油菜再生工程植株基因组DNA,质粒pBLGC DNA(阳性对照)和未转基因油菜基因DNA为模板,分别加入β-1,3-葡聚糖酶基因引物和几丁质酶基因引物进行PCR扩增,结果表明抗kan转基因植株基因组DNA为模板和质粒pBLGC为模板扩增出相同的DNA片段,而未转基因油菜DNA为模板未扩增出DNA片段,从而初步证明以10mg/Lkan和50mg/Lkan两步筛选是有效的,β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶基因已转化入油菜工程植株中.
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