栽培虎杖中白藜芦醇苷提取分离及其抗衰老初探

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白藜芦醇苷是虎杖中主要的活性成分之一,白藜芦醇苷提取物的原料主要为野生虎杖,但野生虎杖资源长期采挖,严重匮乏。因此,开展栽培虎杖中白藜芦醇苷的提取分离及其相关活性的研究,具有重要的理论与应用价值。本文以栽培虎杖为原料,建立白藜芦醇苷的检测方法;对栽培虎杖中白藜芦醇苷及其它活性成分的含量变化规律进行了研究;研究了白藜芦醇苷的提取分离条件;采用线虫模型对白藜芦醇苷的抗衰老活性进行研究。1.白藜芦醇苷的高效液相色谱法(HPLC)的建立及稳定性研究。确定其检测条件为:色谱柱为Diamonsil-C18(250mm×0.46mm,5μm);激发波长为334nm;发射波长为408nm;流动相为25%乙腈;流速为1.0mL/min;柱温为25℃;进样量为10μL。白藜芦醇苷稳定性研究结果表明:太阳光直射白藜芦醇苷破坏较大,而室内白炽灯光对其影响较小,白藜芦醇苷在高温(>70℃)时不稳定,不宜长时间存放。2.栽培虎杖中白藜芦醇苷及其它活性成分含量变化规律研究。对栽培虎杖的不同生长年限、不同月份、虎杖中不同部位的白藜芦醇苷及白藜芦醇、大黄素、大黄素甲醚、大黄酸等物质的含量进行比较。结果表明:虎杖中白藜芦醇苷和白藜芦醇在8月份含量最高,而大黄素等蒽醌类物质在7月到9月含量较高;且上述活性成分的含量逐年增加;根及根茎的各活性成分含量较茎和叶高。3.白藜芦醇苷的提取分离研究。采用乙醇提取法和微波辅助提取法提取虎杖白藜芦醇苷,对两种方法的提取效果进行比较,乙醇提取法的效果较好,采用65%乙醇为溶剂,回流提取1次,每次3h,白藜芦醇苷提取量达到13.83mg/g;选用树脂LSD-001对白藜芦醇苷进行分离,其含量从9.3%提高到51.4%;再结晶纯化,得到纯度为91.5%的白藜芦醇苷。4.白藜芦醇苷的抗衰老活性研究。采用秀丽隐杆线虫模型,给药浓度为50mg/L,白藜芦醇苷组的秀丽线虫寿命最长,较空白组提高了13.07%;在生殖能力、吞咽率、移动力和肠脂褐质等指标可以看出,白藜芦醇苷可以提高线虫的寿命、生殖能力、吞咽率和移动力,降低脂褐质。结果表明,白藜芦醇苷具有较好的抗衰老活性。
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