散发性结直肠癌中P33~(ING1b)的表达、突变及甲基化研究

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目的: ING1(inhibitor of growth 1)基因是新近发现的抑癌基因,它的表达可抑制细胞生长、参与细胞衰老调节和诱导细胞凋亡。研究发现ING1基因有三种不同的亚型p33ING1b、p47ING1a和p24ING1c。目前对P33ING1b的研究较多,它是野生型p53的分子“伴侣”。在人体某些肿瘤中,P33ING1b mRNA的表达水平降低,而基因突变较少,提示p33ING1b并非通过突变而是通过低水平表达影响肿瘤的发生发展。在结直肠癌中,EphA7、E2F等基因的低表达是因为其启动子的甲基化引起的。迄今为止,p33ING1b在结直肠癌中的研究报道较少,尚未见p33ING1b启动子甲基化的研究报道。本研究检测散发性结直肠癌中p33ING1b的mRNA表达、基因突变和启动子甲基化的情况,旨在探讨p33ING1b基因在散发性结直肠癌发生发展中的作用和意义。 方法: P33INC1b mRNA表达、基因突变和启动子甲基化分别用半定量逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、聚合酶链式反应-单链构像多态性(PCR-single strain conformation polymorphism,PCR-SSCP)和甲基化特异性PCR(Methylation Specific PCR,MSP)进行分析。 结果: 1、在46例结直肠癌组织和相应的正常粘膜组织中,p33ING1b mRNA都有不同程度的表达,p33ING1b mRNA在癌组织和正常粘膜组织中的平均光密度比值分别为0.52和1.28,有显著的统计学差异(P<0.05)。Dukes C/D期癌组织中p33ING1b mRNA的平均光密度比值为0.38,低于Dukes A/B期的0.65,有显著的统计学差异(P<0.05)。但它们在不同年龄、性别、肿瘤部位、癌肿侵犯肠管范围和肿瘤分化程度组的比较无明显差别(P>0.05)。 2、对p33ING1b基因外显子1和外显子2的编码区进行检测,46例结直
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