论文部分内容阅读
研究目的:1.测定人体非小细胞肺癌组织和癌旁正常组织中lnc RNA-UCA1、HMGB1、RAGE、NF-κB p65相应蛋白及m RNA的表达情况。2.通过lnc RNA-UCA1、HMGB1、RAGE、NF-κB p65在人体非小细胞肺癌组织中表达的相关性,推测lnc RNA-UCA1通过HMGB1/RAGE信号轴作用于NF-κB通路,从而影响非小细胞肺癌的发生。3.探讨lnc RNA-UCA1、HMGB1、RAGE、NF-κB p65在非小细胞肺癌组织中的表达情况,以及与肺癌临床特点、病理类型等之间的关系。研究方法:1.收集青岛大学附属医院市南院区、黄岛院区胸外科2018年5月至2018年8月期间行肺叶切除手术的新鲜标本40例,所有病例均经病理诊断证实为非小细胞肺癌,同时取相应癌旁正常肺组织(距肿瘤边界5 cm,病理诊断确定无肿瘤细胞浸润)。2.应用免疫组化方法观察其中10例非小细胞肺癌患者的肺癌组织及癌旁正常组织中HMGB1、RAGE的染色情况,分析其在细胞中的定位及表达量。3.应用Western blot半定量蛋白检测方法检测其中12例非小细胞肺癌患者的肺癌组织及癌旁正常组织中HMGB1、RAGE、NF-κB p65蛋白的表达情况。4.采用实时定量基因扩增荧光检测(q PCR)测定共40例非小细胞肺癌患者的肺癌组织及癌旁正常组织中的lnc RNA-UCA1、HMGB1、RAGE、NF-κB p65的m RNA的表达量,内参为β-actin,测算出上述指标在非小细胞肺癌组织中的相对表达量,计算结果使用2–ΔΔCt表示。研究结果:1.免疫组化方法检测HMGB1、RAGE的表达,结果示:HMGB1的染色阳性区域主要为细胞核,RAGE阳性染色部位主要为细胞胞浆,HMGB1在癌组织中的染色面积较正常组织的染色面积大,RAGE在癌组织中的染色面积较正常组织的染色面积小,表明HMGB1在非小细胞肺癌中高表达,而RAGE则呈低表达。2.应用Western blot半定量蛋白检测方法检测其中12例非小细胞肺癌患者肺癌组织及癌旁正常组织中HMGB1、RAGE、NF-κB p65的表达量,结果示:HMGB1、NF-κB p65在癌组织中的表达量明显高于癌旁正常组织,而RAGE在癌组织中的表达量则低于癌旁正常组织。3.q PCR方法定量检测40例病人肺癌组织及癌旁组织中lnc RNA-UCA1、HMGB1 m RNA、RAGE m RNA、NF-κB p65 m RNA的表达,结果示:在非小细胞肺癌组织中,lnc RNA-UCA1、HMGB1 m RNA、NF-κB p65 m RNA的表达量明显高于正常组织,而RAGE m RNA的表达量则显著低于正常组织。4.在非小细胞肺癌中,lnc RNA-UCA1与HMGB1的表达水平呈现正相关,HMGB1与RAGE的表达水平呈现负相关,RAGE与NF-κB p65的表达水平呈现负相关,HMGB1与NF-κB p65之间的表达水平呈高度正相关。5.lncRNA-UCA1、HMGB1、RAGE、NF-κB p65的表达量与非小细胞肺癌分期、分化的程度、肿瘤的大小、是否发生淋巴结转移及病理类型都有着密切的联系,lnc RNA-UCA1、HMGB1、NF-κB p65的表达在II、III期时明显高于I期,低分化时明显高于低分化,肿瘤体积大时明显高于肿瘤体积小的,出现淋巴结转移时明显高于无淋巴结转移,鳞癌中表达高于腺癌;而RAGE的表达恰恰相反,在II、III期时明显低于I期,低分化时明显低于低分化,肿瘤体积大时明显低于肿瘤体积小的,有淋巴结转移时低于未发生淋巴结转移的,鳞癌中低于腺癌;而年龄因素及吸烟史对于lnc RNA-UCA1、RAGE、HMGB1、NF-κB p65在肺癌中的表达则无影响。研究结论:1.在非小细胞肺癌组织中,lnc RNA-UCA1、HMGB1、NF-κB p6高度表达,RAGE呈低表达。2.lnc RNA-UCA1、HMGB1、RAGE、NF-κB p65之间在非小细胞肺癌中的表达具有相关性,推测lnc RNA-UCA1可以通过HMGB1/RAGE信号轴作用于NF-κB通路,对NSCLC的发生、发展有一定影响。3.lnc RNA-UCA1、HMGB1、RAGE、NF-κB p65的表达与肿瘤分期、大小、分化程度、病理类型及是否发生淋巴结转移密切这些因素密切相关,进一步证明以上指标与肿瘤的转移、侵袭有关。