论文部分内容阅读
目的通过观察膝关节炎治疗仪对膝骨性关节炎兔模型关节软骨的形态结构和关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3及HA的影响,探讨膝关节炎治疗仪对兔膝骨性关节炎的疗效和可能的作用机制,为其临床应用及推广提供实验依据。方法将64只新西兰大白兔,雌雄各半,随机分为空白组(16只)和造模组(48只)造模组采用改良Hulth造模法复制膝骨性关节炎兔模型,术后按随机数字表随机分为模型组(16只)、实验组(16只)和对照组(16只)；空白组和模型组不予任何治疗,实验组予以2次/日,30 min/次膝关节炎治疗仪治疗,对照组接受TDP治疗仪2次/日,30 min/次治疗。连续8周,分别从各组中随机抽取8只动物,处死后切取胫骨平台外侧软骨组织,行HE染色,光镜观察软骨组织的形态变化；切取胫骨平台内侧软骨组织,透射电镜观察软骨细胞的超微结构变化；同时采用ELISA法分别测定关节液中IL-β、IL-6、TNF-α、MMP-3、HA的含量。连续干预至16周,处死剩余所有动物,切取胫骨平台外侧软骨组织,HE染色后,光镜下观察软骨组织形态变化；胫骨平台内侧软骨组织行透射电镜观察；同时采用ELISA法分别检测关节液中IL-β、IL-6、TNF-α、MMP-3及HA的含量。结果1.肉眼观察结果：空白组关节软骨表面光滑,外观呈蓝白色。模型组关节表面失去光泽,呈灰黄色,伴有溃疡形成,关节周围结缔组织增生严重；16周时,随着病情进一步加重,软骨下骨板暴露、骨赘形成。实验组和对照组的关节软骨表面仍有光泽,无明显裂纹、糜烂或溃疡,关节周围结缔组织增生均较模型组轻。2.HE染色结果：空白组关节软骨表面平滑,四层结构清晰可辨,软骨细胞排列规则,细胞核蓝色,细胞质均匀红染。模型组关节软骨表面粗糙甚或破损,软骨层变薄,四层结构层次紊乱,软骨细胞数量少,潮线多不完整或完全消失,可见骨髓血管肉芽组织侵入软骨层。实验组和对照组的关节软骨表面不光滑,四层结构层次较模型组情况明显改善,软骨细胞数量明显增多,排列较规则,潮线上移；16周时,对照组关节软骨可见少量血管肉芽组织侵入软骨层,关节软骨层变薄,表浅层软骨细胞消失；实验组在软骨层厚、软骨细胞数量及增生血管肉芽组织方面明显优于对照组。光镜下软骨组织形态学改变的Mankin评分结果显示,模型组、对照组和实验组的Mankin评分均显著高于空白组(P<0.01)；实验组和对照组的Mankin软骨评分明显低于模型组(P<0.01)；实验组的Mankin评分明显低于对照组(P<0.05)。3.电镜结果显示：空白组软骨细胞呈近椭圆形,表面微绒毛样突起,胞质内粗面内质网、高尔基体、线粒体丰富,糖原散在；模型组软骨细胞形状不规则,明显萎缩、坏死,细胞周晕消失,胞核溶解,细胞器不易区分；实验组与对照组介于空白组和模型组之间,软骨细胞萎缩,胞内粗面内质网明显扩张,核内异染质增多、不规则。4.ELISA法检测结果：模型组IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3的含量明显高于空白组(P<0.01),HA浓度则明显低于空白组(P<0.01)；对照组、实验组IL-1β、IL-6、 TNF-α、MMP-3的含量均较模型组降低(P<0.01),HA的浓度明显高于模型组(P<0.01)；实验组IL-1β、IL-6、TNF-1α、MMP-3和HA的含量较对照组有明显差异(P<0.01)。8周时和16周时对比,除空白组外,其余各组IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3和HA的含量均有明显变化(P<0.05)。结论1.膝关节炎治疗仪能明显改善膝骨性关节炎软骨的形态结构,延缓关节软骨的退变。2.膝关节炎治疗仪能上调关节液中HA的表达,下调IL-1β/IL-6、TNF-α和MMP-3的表达,从而保护软骨细胞。