小白菊内酯对人骨肉瘤细胞株MG-63增殖的抑制作用

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背景与目的:小白菊内酯是从芳香类植物中提取的一种倍半萜内酯化合物,是艾菊的主要活性成分。作为一种己经有数百年历史的传统药物,小白菊内酯过去主要用于治疗偏头痛、风湿病及炎症。近年来研究发现,小白菊内酯具有较强的抗肿瘤活性,在体外可抑制多种肿瘤细胞株的生长增殖,并诱导其凋亡,比如肺癌、乳腺癌、结肠癌和多发性骨髓瘤。此外,小白菊内酯还可以增强肿瘤细胞对其他多种抗肿瘤药物的敏感性。但是至今还没有对于骨肉瘤细胞作用的相关报道,本研究的目的是探讨小白菊内酯对人骨肉瘤细胞株MG-63的增殖抑制作用。   方法:本实验所用的人骨肉瘤细胞株MG-63在含有10%的小牛血清的DMEM培养液,于37℃,5%CO2培养箱中培养。取对数生长期的细胞用于实验,给予不同浓度的小白菊内酯后,于不同时间点,通过倒置显微镜观察骨肉瘤细胞的形态,同时用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测MG-63细胞的增殖能力的变化,应用公式计算出不同浓度的小白菊内酯对MG-63细胞的抑制率。为了进一步获得一个明确的量化的对于MG-63细胞凋亡的影响,用Annexin V和PI双染色方法检测细胞的凋亡百分率。实验数据用(均数士标准差)表示,应用SPSS13.0统计软件处理,均数间进行独立样本t检验,P<0.05被认为有显著差异。   结果:细胞形态学观察:倒置显微镜下,对照组细胞呈梭形,细胞核呈圆形,致密,处在一个良好的生长状态。而治疗组细胞形态不规则,边缘粗糙,有不同程度的萎缩。MTT结果表明;不同浓度的小白菊内酯对MG-63细胞的体外生长具有不同程度的抑制作用;随着浓度的加大及作用时间的延长,其抑制作用逐步增强,说明小白菊内酯对MG-63细胞生长的抑制作用,呈浓度和时间依赖性。流式细胞仪结果表明:随着小白菊内酯浓度的升高,(4080120μmol)凋亡细胞明显增多,早期凋亡率分别为(4.15%,7.56%,11.23%),晚期凋亡率和坏死率分别为(1.87%,3.06%,4.33%)早期凋亡和晚期凋亡都有变化,而早期凋亡变化幅度较大。   结论:本实验以人骨肉瘤细胞株MG-63为对象,研究小白菊内酯对肿瘤细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用。结果表明小白菊内酯可以明显抑制骨肉瘤细胞的增殖并促进其凋亡。可见小白菊内酯及其类似倍半萜内酯化合物是有效的抗肿瘤试剂,其可望成为一种新型的抗骨肿瘤化疗药物。
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