【摘 要】
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目的:广藿香酮是广藿香挥发油中的主要成分,具有抗菌、抗病毒和抗炎等功效。近年来研究发现,广藿香酮对肿瘤细胞如结直肠癌HCT116细胞、胆囊癌SGC-996细胞有着明显的抑制作用。肝癌作为一种高发病率和高致死率的癌症,对于广藿香酮是否具有抑制肝癌的作用尚不明确,因此本文通过细胞实验和网络药理学来阐明广藿香酮对肝癌的作用及其机制。方法:1.通过细胞实验探讨广藿香酮对肝癌HepG2细胞的影响,以CCK-
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目的:广藿香酮是广藿香挥发油中的主要成分,具有抗菌、抗病毒和抗炎等功效。近年来研究发现,广藿香酮对肿瘤细胞如结直肠癌HCT116细胞、胆囊癌SGC-996细胞有着明显的抑制作用。肝癌作为一种高发病率和高致死率的癌症,对于广藿香酮是否具有抑制肝癌的作用尚不明确,因此本文通过细胞实验和网络药理学来阐明广藿香酮对肝癌的作用及其机制。方法:1.通过细胞实验探讨广藿香酮对肝癌HepG2细胞的影响,以CCK-8实验和克隆形成实验探讨广藿香酮对HepG2细胞增殖的影响,Hoechst 33258染色实验和流式细胞术检测广藿香酮对HepG2细胞凋亡与周期的影响,划痕实验和Transwell小室实验检测广藿香酮对HepG2细胞迁移、侵袭的影响,并通过Western blot检测相关蛋白的表达情况。2.通过网络药理学探讨了广藿香酮对肝癌的作用靶点及其机制。通过OMIM、Drugbank、Genecards数据库和Pharm Mapper数据库获得了药物-疾病共同靶点,并采用Cytoscape软件绘制出“疾病-靶点-成分”相互作用的网络图,采用STRING数据库构建蛋白相互作用的PPI网络。通过Network Analyzer工具进行拓扑分析,并基于R软件通过Bioconductor生物信息软件包进行关键靶基因GO与KEGG功能富集分析。之后通过分子对接和Western blot验证广藿香酮与核心靶点和通路之间的情况。结果:1.细胞实验探讨了广藿香酮对肝癌HepG2细胞的影响,CCK-8实验和克隆形成实验结果表明广藿香酮能显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖,Hoechst 33258染色实验和流式细胞术结果表明广藿香酮能诱导肝癌HepG2细胞凋亡,并将其周期阻滞于G2/M期,划痕实验和Transwell小室实验结果表明广藿香酮能抑制肝癌HepG2细胞的迁移和侵袭,Western blot对相关蛋白进行检测进一步验证上述发现。2.网络药理学的结果显示,广藿香酮和肝细胞癌之间有52个共同的靶点。通过PPI网络对核心靶点进行筛选,HARS、AKT1、ALB等靶点可能是广藿香酮抑制肝细胞癌的核心靶点。经过R语言运行后,GO结果显示,交集基因集合共富集至1345条生物学过程通路,27条细胞组分表达过程以及83个与分子功能相关的过程中。KEGG结果显示,PI3K-AKT信号通路可能是广藿香酮发挥抑制肝癌作用最为重要的通路。分子对接结果显示,广藿香酮和核心靶点AKT1具有良好的结合效果。通过Western blot检测发现广藿香酮能抑制肝癌HepG2细胞p-PI3K和pAKT的表达。结论:1.广藿香酮能抑制肝癌HepG2细胞的增殖、诱导其凋亡,将其周期阻滞于G2/M期,并抑制其迁移和侵袭。2.网络药理学的结果表明,广藿香酮发挥的抑制肝癌作用可能与PI3K-AKT信号通路有关。
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