刺玫果药材质量控制及降糖药效物质基础研究

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目的:本专项主要是根据中医药用药特点,采用多学科交叉技术,对刺玫果药材质量评价及降糖药效物质基础进行初步研究。材料与方法:依据相关资料报道,采用溶剂极性萃取法,制备刺玫果不同极性提取物;采用高效液相色谱法,建立不同极性化合物最大信息量色谱图;利用药理效应动力学,考察刺玫果不同极性化合物对高脂饲料及链脲佐菌素所致糖尿病大鼠血糖、糖化血红蛋白等影响;将刺玫果不同提取物指纹图谱与上述药理活性相关联,通过相关分析、聚类分析和主成分分析手段,探讨刺玫果降糖的药效物质基础;同时对刺玫果提取物的体外抗氧化试验进行初步研究;对刺玫果药材的生长环境、基原、植物形态和性状特征进行初步研究;采用高效液相色谱法,利用梯度洗脱系统,对刺玫果药材中芦丁、金丝桃苷、槲皮素和山奈素4种成分同时测定。结果:1.通过刺玫果不同极性提取物对高脂饲料及链脲佐菌素所致糖尿病大鼠的血糖值、体重、总胆固醇、高密度脂蛋白、果糖胺、糖化血红蛋白值、低密度脂蛋白、甘油三酯和游离脂肪酸方面的实验研究,结果表明:刺玫果水提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物在降低糖化血红蛋白和果糖胺方面有显著效果;乙酸乙酯提取物在降低总胆固醇和低密度脂蛋白方面有影响趋势。2.将刺玫果不同提取物最大信息色谱图各色谱峰与药理活性相关联,使用SPSS中的双变量相关分析后,得出:1个色谱成分与降低糖化血红蛋白值相关;2个色谱成分与降低果糖胺相关;2个色谱成分与降低游离脂肪酸相关;3个色谱成分与降低空腹血糖值相关。3.刺玫果提取物体外抗氧化试验结果:清除DPPH自由基的能力依次为乙酸乙酯提取物>Vc>正丁醇提取物>水提取物;对超氧阴离子的清除率依次为乙酸乙酯提取物>没食子酸>正丁醇提取物;对羟自由基的抑制率依次为乙酸乙酯提取物>Vc>正丁醇提取物>水提取物;总还原力的测定结果依次为乙酸乙酯提取物>Vc>正丁醇提取物>水提取物。4.对刺玫果药材的生长环境、基原、植物形态和性状特征分别进行了研究。5.采用高效液相色谱法,建立了刺玫果药材中芦丁、金丝桃苷、槲皮素和山奈素4种黄酮类成分同时测定的方法。方法学实验结果表明:芦丁在0.0381~0.4567μg范围内有良好的线性关系,R2=0.9999;金丝桃苷在0.1626~1.9518μg范围内有良好的线性关系,R2=1;槲皮素在0.0539~0.6474μg范围内有良好的线性关系,R2=1;山奈素在0.005~0.0599μg范围内有良好的线性关系,R2=0.9998;精密度及重现性实验结果良好;芦丁的平均加样回收率为96.54%,RSD%为1.92%;金丝桃苷的平均加样回收率为97.55%,RSD%为1.88%;槲皮素的平均加样回收率为96.12%,RSD%为2.23%;山奈素的平均加样回收率为97.92%,RSD%为1.48%。结论:1.将刺玫果不同提取物指纹图谱与上述药理活性相关联,通过相关分析、聚类分析和主成分分析手段,得到了刺玫果中具有降糖作用的色谱成分。2.体外抗氧化试验结果表明:刺玫果乙酸乙酯提取物具有较强的抗氧化活性,为刺玫果具有抗衰老、防治心血管疾病等作用提供理论参考。3.初步研究了刺玫果药材的生长环境、基原、植物形态和性状特征,为下一步研究打下基础。4.建立的质量标准草案能够对刺玫果药材进行有效的定量分析。
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