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引言:OHSS是在诱发排卵过程中最严重的并发症,排卵过程中伴随着组织的损伤能够引起血浆和滤泡液体(FF)中组织因子(TF)、内皮细胞生长因子(VEGF)的上调,同时会下调组织因子通路抑制剂(TFPI)的表达水平,尤其是在体外受精采用控制性排卵(OCH)过程中更易引起上述并发症。材料和方法:一项采用对照匹配的前瞻性研究总共纳入300名患者,分为3组,第一组为PC0或PCOS患者(随机分为两个亚组,IA和IB组有匹配的对照组;另设对照组IC),第二组为存在发展成OHSS的高度危险因素患者(随机分为两个亚组,ⅡA和ⅡB组有匹配的对照组;另设对照组ⅡC),第三组为严重的OHSS患者(随机分为ⅢA和ⅢB两个亚组)。ⅠA组患者在COH开始时给予每天一次4100IU的速碧林注射剂,而ⅡA组患者在注射HCG的同时给予每天一次4100IU的速碧林注射剂,直到证实能否妊娠。ⅢA组患者是在被诊断为OHSS时,给予每天一次4100IU的速碧林注射剂直到完全恢复。ⅠB,ⅡB和ⅢB组患者在相同的时间点给予安慰剂。Ⅰ组和Ⅱ组患者血浆和卵泡液中的VEGF、TF、TFPI用ELISA试剂盒在4个连续的时间点被检测(促性腺激素开始时,HCG开始时,卵子取出时,胚胎移植时)。而第Ⅲ组的患者血浆中上述因子的浓度被隔天检测一次。在体外,60名患者的颗粒细胞(PCO/PCOS,Ⅰ组患者;存在发展为OHSS的高度危险因素的Ⅱ组患者以及它们相对应的对照组)被收集后进行原代培养(每组选20名),培养过程中,在培养基中加入IIU/ml浓度的HCG以及不同浓度的速碧林注射剂(0,5,50μg/ml)。连续共培养3天后收集颗粒细胞,提取RNA,使用VEGF165, VEGF121TF, TFPI,和GAPDH的启动子,利用实时荧光定量PCR技术检测上述蛋白mRNA的表达水平。而且,通过检测血浆中VEGF、TF、TFPI的表达状况来观察速碧林治疗对OHSS患者的影响作用。同时,通过在颗粒状细胞(GC)原代培养过程中加入速碧林以及(NF-kB, JNK, Akt)三条信号通路的抑制剂,重复用实时荧光定量PCR技术检测VEGF165, VEGF212, TF, TFPI以及GAPDH的mRNA表达情况,来进一步探讨速碧林影响GC的具体机制。另外,利用免疫荧光技术进一步检测VEGF受体(VEGFR1、VEGFR2)在卵巢组织中的表达水平和原代培养颗粒细胞中的表达情况。卵巢组织标本取自正常对照人群以及PCO/PCOS患者。颗粒细胞取自正常人群、PCO/PCOS患者以及存在高危发展为OHSS患者(要么具有高水平的E2和取卵时有复合的成熟卵泡≥20个的患者),持续培养48小时。最后,用WesternBlot技术来检测VEGF受体(VEGFR1和VEGFR2)在上述相同分组的不育患者颗粒细胞中的表达情况。最后,WesternBlot用来检测VEGF受体(VEGFR1和VEGFR2)在相同三组不育患者颗粒状细胞中的表达情况。结果:ⅠB组和ⅡB组与其相对应的对照组在各个时间点相比,血浆和FF中VEGF、TF的表达水平明显上调,而TFPI的表达水平明显下调。除了TFPI在取卵当天以及FF中ⅠB组与ⅠC组比较外,没有明显差异。相同的分组同样也显示,VEGF165, VEGF121,和TF的mRNA水平明显高表达,TFPI的mRNA水平明显低表达,除了VEGF121和TFPI的表达水平在Ⅰ组和Ⅱ组与其对照组相比外。在同样的分组,其培养上清中,用ELISA方法检测,显示明显的VEGF、TF的高水平表达以及TFPI的低水平表达。在ⅠA组的各个时间点与ⅠIB组相比,速碧林能明显的下调血浆及FF中VEGF、TF的表达水平,上调TFPI的表达水平。ⅠA组与ⅠB组、ⅡB组相比,OHSS的发展明显的下降。同样的上述组显示显著的VEGF165, VEGF121,以及TF的mRNA表达水平下调以及TFPI的nRNA水平下调与其对照组相比。ELISA检测发现培养液中VEGF、TF的表达量下调以及TFPI的表达上调。IIIA组与IIIIB组相比,在IIIA早期以及晚期的OHSS患者中都发现血浆VEGF.TF的量明显下调以及TFPI的量明显上调。在Ⅰ组和Ⅱ组颗粒细胞中发现,速碧林的作用被NF-kB、JNK和Akt通路的缃抑制剂抑制。免疫荧光学显示:VEGF受体(VEGFR1、VEGFR2)在PCO/PCOS患者中的表达明显高于正常对照组。免疫荧光以及WesternBlot显示:VEGF受体(VEGFR1、VEGFR2)以及其蛋白水平在PCO/PCOS组、存在高危发展为OHSS患者组中的表达明显高于正常对照组。结论:在PCO/PCOS不育患者以及有高危发展成OHSS的患者中,VEGF、TF和TFPI具有预测价值。如果在COH开始时使用速碧林,能够阻止发展为OHSS,同样对于已经发展为OHSS的不育患者,速碧林也具有治疗作用。