论文部分内容阅读
绒毛膜癌好发于育龄期妇女,易较早发生血行转移,是一种高度恶性的滋养细胞肿瘤。化疗是绒毛膜癌首选的主要治疗手段,且绒癌通过化疗可以治愈。目前临床常用的化疗药物有5-FU、MTX等,然而在临床治疗中,部分患者可出现耐药及复发现象,加大常规化疗药物剂量,虽然可以获得一定的疗效,但是药物副作用大,给患者身体及心理造成很大伤害。所以寻找新的化疗药物来优化治疗方案,降低毒副作用,增加化疗敏感性是非常必要的。泛素-蛋白酶体抑制剂硼替佐米是一种新型抗肿瘤靶向治疗药物,其已被应用于难治性复发性多发性骨髓瘤的临床治疗,效果显著。较多体内、体外研究显示硼替佐米对多种肿瘤细胞有杀伤作用,并能增加肿瘤细胞对其他化疗药物的敏感性。但是关于硼替佐米对绒癌细胞的作用国内外尚未见报道。本研究将硼替佐米单独或与5-FU联合作用于绒癌JEG-3细胞,研究硼替佐米抑制绒癌JEG-3细胞增殖及诱导其凋亡的作用,并探讨硼替佐米作用中NF-κB表达的变化,以及硼替佐米与5-FU联合作用的抗肿瘤效应。本研究将人绒癌JEG-3细胞株分为硼替佐米组(0.1-200nmol/1)5-FU组(0.025-200μg/ml)、硼替佐米+5-FU组(10nmol/1+0.025μg/ml10nmol/1+0.25μg/ml、10nmol/1+2.5μg/ml、10nmol/1+25对照组(不加任何药物)。采用CCK-8法检测各组药物对绒癌细胞的增殖抑制作用；Annexin V/PI染色及流式细胞术分析药物对细胞凋亡的影响；光学显微镜及荧光显微镜观察细胞形态变化；采用免疫荧光法检测细胞中NF-κB表达。结果显示,硼替佐米组JEG-3细胞增殖抑制率为(4.43±0.02)%～(71.31±0.54)%明显高于对照组(P<0.05),且作用具有时间-浓度依赖性；硼替佐米组细胞凋亡率为(16.61±0.81)%,高于对照组(P<0.05)；终浓度为10nmol/l硼替佐米处理绒癌JEG-3细胞48h后,经免疫荧光法检测结果显示：处理组凋亡细胞中NF-κB表达增强。5-FU组JEG-3细胞增殖抑制率为(12.70±01)%(75.35+0.57)%,明显高于对照组(P<0.05)；硼替佐米+5-FU组的细胞增殖抑制率为(60.16±0.40)%、(67.00±0.29)%,均高于单用硼替佐米或单用5-FU组,差异有统计学意义(P<0.05)；硼替佐米+5-FU组的凋亡率为(19.44±0.38)%均高于单用硼替佐米组或5-FU组(P<0.05)；硼替佐米与5-FU联合作用于JEG-3细胞后,CDI值均小于0.85。上述结果表明：硼替佐米呈浓度、时间依赖性抑制人绒癌JEG-3细胞的增殖,诱导其凋亡,且诱导细胞凋亡可能与NF-κB表达增强有关。硼替佐米与小剂量5-FU连用时,能有效抑制绒癌细胞JEG-3的生长并诱导其凋亡,有协同效应。