IL-17A对成牙骨质细胞凋亡及氧化应激反应的实验研究

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目的:通过IL-17A干预OCCM-30,探讨IL-17A在牙根吸收修复过程中的作用,以期为临床上正畸治疗中防止牙根吸收提供实验依据。方法:将OCCM-30细胞置于细胞培养箱内培养,将其分为6组:实验组5组和对照组1组。实验组分别用含10ng/ml、20 ng/ml、30 ng/ml、40 ng/ml、50 ng/ml IL-17A的培养液处理细胞,对照组使用不含IL-17A的完全培养液,进行如下检测:1、细胞增殖与活性的检测IL-17A处理细胞24h、48h、72h后,分别用细胞增殖与活性检测(CCK-8)检测各组细胞的增殖能力;2、细胞凋亡的检测IL-17A处理细胞48h后,用流式细胞术(FCM)检测各组细胞凋亡情况,并统计凋亡率;3、细胞内活性氧(ROS)水平的检测IL-17A处理细胞48h后,用FCM检测各组细胞内ROS水平。结果:1、细胞增殖的检测IL-17A作用OCCM-30 24h后,不同浓度梯度的实验组吸光度值与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。而在IL-17A作用48h和72h后,OCCM-30吸光度值呈浓度依赖性降低,差异有明显统计学意义(P<0.01)。2、细胞凋亡的检测在IL-17A作用OCCM-30 48h后,细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率与对照组相比显著升高,差异具有明显统计学意义(P<0.01),其中50ng/ml的浓度组早期凋亡率和晚期凋亡率最高,与IL-17A的浓度呈正比。3、细胞内ROS水平检测在经过IL-17A作用OCCM-30 48h后各实验组细胞内ROS水平均有升高,其中10ng/ml的浓度组细胞内ROS含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);20、30、40、50ng/ml浓度组的细胞内ROS含量明显高于对照组,呈浓度依赖性升高,差异有明显统计学意义(P<0.01)。结论:1、IL-17A在10-50ng/ml的范围内可抑制OCCM-30增殖,并且随浓度的升高,药物抑制细胞增殖的作用更明显,呈浓度依赖性。2、IL-17A在10-50ng/ml的范围内对OCCM-30有明显的促凋亡作用,细胞凋亡率随IL-17A浓度的增加呈浓度依赖性升高。3、IL-17A能诱导OCCM-30细胞ROS的产生,细胞内ROS水平随IL-17A浓度的增加呈浓度依赖性升高。综上所述,IL-17A可能是通过促使OCCM-30细胞发生氧化应激反应,使细胞内ROS水平升高,从而促进细胞凋亡,抑制细胞增殖。
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