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本论文旨在研究日粮中添加L-肉碱对母猪繁殖性能的影响及相关作用机理,研究包括动物试验和细胞培养两部分。动物试验选择了遗传一致、胎次3~5胎的长大二元母猪40头,随机分为对照组(0mg/kg L-肉碱)和试验组(50mg/kg L-肉碱)两个处理组,每组20头母猪,研究过程包括了母猪妊娠期和泌乳期两个阶段。细胞培养采用SD大鼠胎盘滋养层细胞作为研究对象,对L-肉碱提高母猪繁殖性能的机理作一旁证。研究结果显示: 1.添加L-肉碱对母猪产仔性能有较大影响,试验组母猪总产仔数和产活仔数比对照组分别提高了0.76头和0.78头,试验组仔猪初生窝重和21日龄断奶窝重比对照组都有增加,但差异不显著(P>0.05)。添加50mg/kg肉碱显著降低了母猪产弱仔的比率(P<0.05),但对死胎率、畸形率和木乃伊率没有影响。L-肉碱有提高哺乳仔猪成活率的趋势,但差异不显著(P>0.05)。添加L-肉碱可以提高母猪的配种受胎率,缩短母猪断奶至再发情的时间间隔(P<0.05),并且显著提高了母猪断奶后5天内的发情率(P<0.05)。添加L-肉碱显著提高了泌乳母猪初乳中的乳脂含量(P<0.05),乳蛋白含量也有较大程度提高(P<0.1),但对初乳中的乳糖、非脂固形物和泌乳第11天乳中的常规成分没有影响,试验组母猪初乳中的IgG也显著高于对照组(P<0.05)。 2.妊娠60天时,添加L-肉碱显著降低了母猪血浆葡萄糖的浓度(P<0.01),极显著升高了血浆中甘油三酯的浓度(P<0.01),到妊娠90天时,试验组母猪血浆中甘油三酯的浓度仍高于对照组,但差异不显著(P>0.05)。妊娠60天时,添加L-肉碱可使母猪血浆中游离脂肪酸浓度升高,但统计上差异不显著(P>0.05),到妊娠90天时,各处理组间血浆游离脂肪酸浓度基本无差异。妊娠60天时,试验组母猪血浆胰岛素浓度有增高的趋势(P=0.18),到妊娠90天时,各处理组间胰岛素浓度差异进一步缩小。妊娠60天时,L-肉碱极显著提高了血浆IGF-1的浓度(P<0.01),到妊娠90天时,试验组母猪血浆IGF-1浓度仍高于对照组,但没有达到差异显著水平(P>0.05)。妊娠60天和90天,L-肉碱都不同程度地提高了母猪血浆中IGF-2的浓度,但差异不显著(P>0.05)。妊娠60天时,L-肉碱极显著降低了血浆中IGFBP-3的浓度(P<0.01),到妊娠90天时,对照组母猪血浆中IGFBP-3的浓度仍高于试验组母猪,但差异不显著(P>0.05)。泌乳第11天,L-肉碱在数值上增加了母猪血浆中IGF-1的浓度,但差异不显著(P>0.05),血浆中催乳素浓度没有被影响。 3.通过组织切片观察发现,添加L-肉碱的母猪胎盘绒毛膜上皮完整、结构清晰,毛细血管未见淤血、坏死等变化,而没有添加L-肉碱的母猪胎盘绒毛膜上皮可见缺损,部分区域出现上皮坏死及渗出变化、形成小血栓。总体来说,添加L-肉碱促进了母猪胎盘绒毛膜的发育。 4.荧光定量PCR研究显示,L-肉碱显著上调了母猪胎盘绒毛膜中IGF-1mRNA的表达水平(P<0.05)。在L-肉碱的作用下,绒毛膜中GLUT-1mRNA表达量虽没有显著增加,但也有较明显的上调趋势(P<0.1),并一定程度上调了IGF-2和IGFBP-3两个基因的mRNA表达量(P>0.05)。 5.Western blot免疫印迹结果表明,L-肉碱显著上调了母猪胎盘绒毛膜IGF-1的蛋白表达量(P<0.05),极显著上调了IGF-2的蛋白表达量(P<0.01)。添加L-肉碱虽然没有使母猪胎盘绒毛膜中GLUT-1蛋白表达量显著增加,但也有较明显的上调趋势(P<0.1)。 6.对SD大鼠胎盘滋养层细胞的体外培养结果显示,1mmol/L和10mmol/L的L-肉碱添加剂量对大鼠滋养层细胞的增殖都有显著促进作用(P<0.05)。1mmol/L的L-肉碱添加剂量对大鼠滋养层细胞GLUT-1、IGF-1、IGF-2和IGFBP-3四个基因的mRNA表达量均没有显著影响(P>0.05)。10mmol/L的L-肉碱剂量则显著上调了滋养层细胞IGF-1和IGF-2基因的mRNA表达量(P<0.05),并对GLUT-1和IGFBP-3的mRNA表达量也有不同程度的上调作用(P>0.05)。 本研究最终得出如下结论:L-肉碱确实可以提高母猪的繁殖性能,其主要通过如下方式显示作用:增加了妊娠期母猪血浆IGF-1和IGF-2水平,提高了胎盘绒毛膜中GLUT-1和IGF系统的mRNA和蛋白表达水平,促进了胎盘发育,增强了胎盘养分转运功能,从而提高了母猪的繁殖性能。