胃癌死亡率高，预后差，大部分就诊胃癌为进展期胃癌，而其中大部分病人在胃癌根治术后复发和转移。因此以手术为主辅以术后化疗和术前新辅助化疗的全身综合治疗就显得非常重要，但其化疗有效率受化疗耐药的影响而明显受限。Cisplatin是国内外肿瘤临床辅助化疗和新辅助化疗最常选用的药物之一，但患者癌细胞内耐药性的存在降低了Cisplatin的实际疗效。Survivin是新近发现的一种凋亡抑制基因，高水平的Survivin基因表达与肿瘤的复发及化疗耐受、预后差、生存率低有关。非甾体类抗炎药(NSAID)的肿瘤化学预防作用正在受到越来越多的关注，但其作用机制不明。而使用NSAID-Indomethacin可呈剂量依赖性地减少胃粘膜上皮Survivin表达，从而引起严重的胃粘膜损伤。这提示我们NSAID对肿瘤的化学预防作用是否也与Survivin表达改变有关。因此，我们推想Survivin基因可能是Cisplatin对胃癌化疗耐药的关键因素之一，并参与了NSAID对胃癌的化学预防作用机制，将最经典的NSAID-Aspirin与Cisplatin联合应用可能会增强Cisplatin对耐药株的疗效，提高化疗敏感性，改善进展期胃癌预后。已有文献证实胃癌和多种基因的多态性相关，髓过氧化物酶(MPO)是一个氧化应激相关酶，流行病学研究已在多种恶性肿瘤中观察了MPO G-463A多态性的作用，但尚没有研究关注MPO多态性和胃癌风险，另外，目前仅有Xu报道了Survivin基因突变可能与部分培养肿瘤细胞中Survivin表达增高有关，而其与胃癌易感性未见研究报道。深入开展胃癌相关基因多态性与胃癌易感性研究有利于我们进一步了解胃癌发病机理，为探索胃癌一级预防及有效的基因治疗手段奠定基础。一、Aspirin对SGC7901细胞株抑制作用及机制研究采用体外细胞培养的方法，通过苔盼蓝染色初步筛选后，采用MTT、流式细胞仪、RT-PCR及Western-blot等方法检测了浓度分别为1、3和10mM的Aspirin作用于胃癌SGC7901细胞株24小时及浓度3mM的Aspirin分别作用于SGC7901细胞株24、48和72小时后细胞生长抑制、凋亡及Survivin的表达情况，探讨Aspirin对SGC7901抑制作用，并探讨其涉及Survivin的相关机制。结果发现：1、一定浓度的Aspirin能抑制SGC7901的增殖，且对细胞增殖的抑制作用有明显的浓度和时间依赖性；2、Aspirin主要是通过诱导细胞凋亡抑制SGC7901细胞的增殖与生长，而且其诱导凋亡具有明显的时间和浓度依赖性；3、Survivin基因mRNA及蛋白的表达随着Aspirin浓度增加或时间延长而逐渐减弱。结果提示：Survivin表达减少可能是Aspirin促进SGC7901细胞凋亡和抑制其增殖的一个关键因素。二、SGC7901／CDDP建立及Survivin在Cisplatin耐药中作用研究通过体外细胞培养的方法，逐步递增Cisplatin浓度，间歇作用SGC7901细胞株诱导建立人胃癌Cisplatin耐药细胞系SGC7901／CDDP，观察了其形态学的变化，并通过RT-PCR及Western-blot方法检测两株细胞中Survivin的表达改变，探讨Survivin在小剂量Cisplatin长期作用于胃癌SGC7901细胞耐药机制中的作用。结果：1、SGC7901／CDDP与其亲本细胞之间存在明显的形态学差异；2、SGC7901／CDDP中Survivin基因mRNA及蛋白表达较SGC7901明显增高，差异有显著性(p＜0.05)。结果提示：Cisplatin对SGC-7901耐药可能与长期小剂量Cisplatin诱导了SGC7901／CDDP中Survivin表达增加有关。三、Aspirin联合Cisplatin对SGC7901／CDDP的作用和机制研究我们以前面实验建成的SGC7901／CDDP为研究对象，分为单用Aspirin、单用Cisplatin以及Aspirin联合Cisplatin三组对其作用24小时，采用MTT、流式细胞仪、RT-PCR及Western-blot等方法检测了各组细胞生长抑制、凋亡及Survivin的表达情况，并对其作用机制进行了初步探讨。结果发现：1、Aspirin联合Cisplatin组SGC7901／CDDP存活率较对照组明显降低；2、Aspirin联合Cisplatin组SGC7901／CDDP中细胞凋亡率较对照组明显增高；3、Aspirin联合Cisplatin组SGC7901／CDDP中Survivin基因mRNA及蛋白的表达较对照组明显降低(p＜0.05)。结果提示：Aspirin能够增强SGC7901／CDDP对Cisplatin的敏感性，促进其抑制SGC7901／CDDP细胞增殖，其机制可能与Aspirin降低了SGC7901／CDDP内Survivin表达，诱导细胞凋亡增加有关。四、Myeloperoxidase G-463A基因多态性与胃癌风险：病例对照研究在本病例对照研究中，我们以PCR-限制性片段长度多态(restriction fragment length polymorphism，RFLP)方法检测MPO G-463A在胃癌病人中的发生率。结果：病例和对照组在MPO-463G／A基因型的分布上存在显著性差异(x~2=7.42，P=0.03)。携带变异基因型(GA或AA)与携带GG的人相比，胃癌风险下降44％[调节风险比(OR)=0.56；95％可信区间(CI)：0.32-0.97]。分层分析显示A等位基因的保护作用在男性或者年轻人(年龄小于58岁)中有统计学意义(男性：调节OR=0.51；95％CI：0.26-0.98，年轻人：调节OR=0.42；95％CI：0.18-0.94))，但在女性或年老人(年龄大于等于58岁)中没有意义。另外，居住农村或郊区的带有变异基因型的人，胃癌风险也明显降低(调节OR=0.41；95％CI：0.18-0.95)。本研究未能观察到MPO G-463A多态性与吸烟的交互作用。肿瘤分化程度与此多态性也没有相关性。结果提示：中国人群MPO-463A多态性与胃癌风险降低相关。五、Survivin C-31G多态性和胃癌风险相关性研究Survivin是一个双功能蛋白，能抑制凋亡和调节细胞分化。它参与了胃癌侵袭和／或转移的发生和发展。Survivin启动子C-31G多态性能抑制survvin基因细胞循环依赖性转录，导致Survivin mRNA和蛋白的过表达。在本中国人群的病例对照研究中，我们用PCR-RFLP方法调查了SurvivinC-31G多态性和胃癌风险的相关性。此多态性的分布在病例组和对照组没有差异(P=0.35)。变异基因型和胃癌风险之间也没有统计学相关性(调节OR值=0.70；95％CI：0.45-1.08)。然而，变异基因型(GG+GC)和远端(调节OR值=0.50；95％CI：0.30-0.83)，高分化(调节OR值=0.46；95％CI：0.22-0.97)或周围淋巴无转移(调节OR值=0.53；95％CI：0.29-0.96)的胃癌有相关性。我们的结果提示在中国人群Survivin C-31G多态性可能和远端胃的癌变，以及肿瘤的分化和进展相关。