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目的:探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,r EPO)对新生鼠脑室周围白质软化(periventricular leukomalacia,PVL)动物模型的神经保护作用。方法:随机选取P3新生鼠通过结扎左颈总动脉,吸入(8%O2+N292%)缺氧70min制作新生鼠PVL动物模型共48只;将PVL动物模型随机分为PVL模型组(24只)、r EPO干预组(24只);随机选取相同日龄24只新生鼠只分离、不结扎、不缺氧作为假手术组。r EPO干预组给予r EPO(5iu/g-1.d-1)连续腹腔注射7d;PVL组及假手术组予相同容积生理盐水;于术后3d、7d、14d取脑组织;采取HE和卢卡斯固蓝染色(Luxol fast blue,LFB)观察不同时间点三组脑组织病理改变,同时免疫组织化学方法检测脑室周围白质区2’3’-环核苷酸3’-磷酸二酯酶(2’,3’-Cyclic-nucleotide3’-phosphodiesterase,CNPase)、神经胶质抗原2(Neuron-glial antigen 2,NG2)表达。结果:1三组新生鼠术后临床表现在缺氧过程中PVL模型新生鼠早期表现以躁动、呼吸增快及皮肤苍白等为主,随着缺氧时间延长,出现皮肤发绀、抽搐、活动减少、嗜睡。后期PVL模型的新生鼠出现体重增长迟缓、睁眼延迟及毛发稀疏等;但r EPO干预组表现较PVL模型组减轻;假手术组无上述表现。2三组新生鼠脑组织光镜下病理学结果术后3d,PVL模型组及r EPO干预组新生鼠的侧脑室周围均可见散在炎性细胞浸润,细胞水肿,神经元变性,部分呈空泡状,伴小胶质细胞增生;术后7d,PVL模型组侧脑室周围白质病理改变较前加重,组织疏松明显,见多发液化灶及筛状软化灶形成;术后14d,PVL模型组左侧侧脑室明显扩大,伴囊腔、胶质瘢痕形成,脑组织、胼胝体萎缩;同一时间点比较r EPO干预组侧脑室周围病变损伤程度较PVL模型组轻。假手术组新生鼠,在相应日龄侧脑室周围白质区未见改变。3三组新生鼠髓鞘LFB染色结果术后3d,PVL模型组及r EPO干预组可见髓鞘水肿,部分髓鞘断裂,髓鞘染色深浅不一,部分髓鞘染色阴性,伴空泡形成;术后7d,PVL模型组及r EPO干预组髓鞘水肿加重,髓鞘区见大量空泡形成,髓鞘染色较术后3d浅;术后14d,PVL模型组髓鞘水肿、空泡较前减少,染色较前加深,神经纤维走形呈条索状或网状;在术后7d、14d,r EPO干预组髓鞘病变较PVL模型组减轻;假组织在术后3d、7d、14d髓鞘结构清晰,染色均匀,神经纤维走行清晰而规则。4 CNPase和NG2免疫组织化学染色4.1侧脑室周围白质区CNPase表达结果三组新生鼠侧脑室周围白质区均可见CNPase阳性表达。同一时间点假手术组、r EPO干预组、PVL模型组进行组间比较,假手术组CNPase阳性的表达量最多,r EPO干预组表达居中,PVL模型组最少,P<0.05;同组不同时间点比较,假手术组CNPase阳性表达在术后3d最多,术后14d表达最少,术后7d居中,P<0.05;PVL模型组及r EPO干预组在术后7d表达最少,术后14d表达最多,P<0.05。4.2侧脑室周围白质区NG2表达结果三组新生鼠脑室周围白质区均可见NG2阳性表达。同一时间点三组比较,r EPO干预组NG2阳性表达最多,PVL模型组次之,假手术组表达最少,P<0.05;同组术后3d、7d、14d比较,NG2阳性表达量逐渐下降,P<0.05。结论:1 r EPO可减轻PVL新生鼠模型侧脑室周围白质病理改变及髓鞘损伤;提示r EPO可能在神经保护方面有重要的作用。2 r EPO可促进PVL新生鼠模型侧脑室周围白质CNPase、NG2的表达,推测外源性r EPO可减轻缺血缺氧所致的少突胶质细胞(Oligodendrocytes,OLs)损伤,促进少突胶质细胞前体细胞(Pre-myelinating oligodendrocytes,pre-OLs)分化和髓鞘修复。