强力霉素抑制结肠癌增殖、转移的实验研究

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目的:探讨强力霉素(Doxycycline,DC)抑制结肠癌LoVo细胞增殖的作用机制和对明胶酶(MMP-2、MMP-9)表达的影响。方法:采用四氮唑蓝比色还原法检测DC对LoVo细胞增殖的影响,应用流式细胞仪AnnexinV-PI双染法检测LoVo细胞凋亡,同时利用流式细胞仪测定细胞线粒体跨膜电位,采用免疫组织化学法检测细胞表达MMP-2,9。结果:(1) DC抑制LoVo细胞的增殖:5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml DC作用24h后,生长抑制率分别为16.4%、37.0%、44.6%(P<0.01;P<0.01;P<0.01),作用48h后,生长抑制率分别18.6%、39.7%、49.2%(P<0.01;P<0.01;P<0.01),呈剂量、时间依赖性;(2) DC诱导LoVo细胞凋亡:在作用24h后,5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml DC诱导LoVo细胞凋亡比率分别为7.79±0.07%、16.05±0.25%、17.42±0.08%,与对照组1.04±0.05%相比差异有显著意义(P<0.01;P<0.01;P<0.01);(3) LoVo细胞线粒体跨膜电位:DC作用24h后,5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml组细胞线粒体跨膜电位下降比率分别为6.53±0.06%、23.28±0.47%、26.08±0.39%,与对照组1.51±0.03%相比差异有显著意义(P<0.01;P<0.01;P<0.01);(4) LoVo细胞表达MMP-2,9:DC作用24h后,LoVo细胞表达MMP-2、9量下降,并呈剂量依赖性。结论:(1)体外实验证实强力霉素通过线粒体通路诱导细胞凋亡,从而抑制结肠癌LoVo细胞增殖;(2)体外实验还证实强力霉素抑制结肠癌LoVo细胞MMP-2和MMP-9的表达。
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