烟草是世界上许多地区重要的经济作物，也是影响我国财政经济的国税收入行业，故烟草质量的优劣对国计民生有重大影响。然而，烟支霉变现象的发生不仅给烟草企业带来经济损失，更对品牌价值造成不可估量的损失。烟支的霉变是由于霉菌等微生物在烟叶上生长繁殖引起的。在烟支霉变后，各化学成分都发生较大变化，降低了品质。霉变严重时，烟支就完全失去使用价值。本文以标准GB4789.15食品中霉菌和酵母菌检验计数为基础，对烟叶及烟支中微生物的检测方法进行了探索，建立了适合烟草/烟支微生物分离计数的检测方法。方法包括：以均质器拍打处理烟叶样品，采用PCA、PDA、孟加拉红、高盐察氏、DG18五种培养基分离微生物，培养真菌温度为28℃，培养细菌温度为36℃，微生物计数方法为平板计数法。通过对5种品牌烟支进行人工促霉研究发现，在贮存6个月时，YD、TY、CY烟支未包装样品都出现霉变现象，且样品中嗜干霉菌数量显著高于同期其他样品，而JQ、BL烟支在贮存期内微生物数量无显著增加。研究对比了正常烟支与霉变烟支微生物的种群和数量，利用或然事件研究方法确定了5种烟支致霉菌，分别编号为A1、A2、A3、A4、A5。通过单菌落形态观察及显微镜孢子和菌丝观察，初步鉴定得到A1为枝孢霉属霉菌，A2为曲霉属黄曲霉菌，A4为青霉属桔青霉菌，A3、A5未能鉴定种属。通过烟支霉变影响因素的分析研究发现，当烟丝含水率超过13%时，烟丝中霉菌含量显著增加，发生霉变的风险增大；当成品烟支包装密封度低于60mmH2O时，随着放置时间的延长，样品中微生物数量显著增加；当成品烟支样品在温度28℃、湿度为80%环境下存放时，会引起霉菌的显著增加，但在温度和湿度相对较低的环境下，微生物数量不会显著增加；成品烟支不同包装方式可能引起细菌和酵母菌数量的差异，但对霉菌的数量无明显影响。对成品烟支3个关键生产工序前后微生物数量对比发现，料液的加入会导致微生物数量的增加，且随着储存时间延长，可能引起烟叶的霉变，而其他2个工序前后微生物数量无较大差异。通过烟支生产过程中重要生产原料及环境中微生物的检测发现，烟支中霉菌的主要来源为片烟原料，其他烟用辅料（卷烟纸、内衬纸、香料液）中微生物含量较少；此外，生产环境中也存在一定量的细菌和真菌，其中掺配加香工序中微生物数量最多，且生产环境收集的烟末中微生物数量也显著多于叶丝和梗丝，表明成品烟支在生产过程中存在着一定污染风险。