论文部分内容阅读
和田羊是一种优良的新疆地方特色绵羊品种,是和田地区畜牧养殖农户主要经济来源之一。和田羊还是一种适应低营养环境生存的较好的品种,它的羊毛以编织东方特色和田地毯闻名于世界。此外,通过国内外学者们针对绒山羊、湖羊、美利奴羊等多种动物毛发生长发育及性状调控的相关研究,角蛋白基因成为影响毛囊发育的重要候选基因之一,该类型基因可能对绵羊羊毛的生产性状具有很大的影响。本试验以4月龄的平原型、山区型和田羊为研究对象,于2、4、6、8月分批次采取绵羊腹侧部皮肤样本,通过制作常规动物组织切片,观察毛囊结构并分析毛囊密度变化;接着进一步提取两种和田羊的皮肤组织的总RNA,采用PCR扩增等分子生物学技术分别对其KAPs、KIFs角蛋白基因(分别为KAP1.1、KAP2.12、KAP3.2、KAP4.2、KAP5.5、KAP6.1、KAP7、KAP8、KIF1.2、KIF2.9)进行定性分析;最后利用实时荧光定量技术,SYBR Green荧光染料法,对不同类型和田羊10个毛囊角蛋白基因进行相对定量差异性分析。试验结果:(1)毛囊形态学结构观察结果发现初级毛囊结构清晰,层次分明,以及界限较为明显的毛囊群结构;毛囊密度分析发现平原型和田羊次级毛囊密度在不同月份差异不大,整体呈递增趋势;山区型和田羊次级毛囊密度在6月到8月上升趋势较为明显;总的来说次级毛囊密度在4月到8月期间是增殖的关键阶段;(2)平原型与山区型和田羊KAPs和KIFs角蛋白基因阳性克隆经鉴定后,送测序结果发现同源性均高达95%以上,分析后发现即使有少数碱基突变对氨基酸成分及组成影响并不大;(3)定量分析可知10个角蛋白基因中:KAP1.1基因表达量(P>0.05)差异不显著,KAP2.12基因表达量(P<0.05)差异显著,KAP3.2基因表达量(P>0.05)差异显著,KAP4.2基因表达量(P<0.01)差异极显著,KAP5.5基因表达量(P>0.05)差异不显著,KAP6.1基因表达量(P>0.05)差异不显著,KAP7基因表达量(P>0.05)差异不显著,KAP8基因表达量(P<0.05)差异显著,KIF1.2基因表达量(P>0.05)差异不显著,KIF2.9基因表达量(P>0.05)差异不显著。结论:(1)和田羊毛囊形态学观察,发现其结构基本与大多数动物皮肤毛囊结构相似,且毛囊群以一元和二元毛囊群居多;山区型和田羊密度稍优于平原型和田羊毛囊密度;(2)基因定性分析可以明确10个角蛋白基因均在绵羊皮肤中存在;(3)针对两种和田羊的实时荧光定量分析结果显示KAP2.12、KAP3.2、KAP4.2、KAP8基因的相对表达量差异都是显著的,其中KAP4.2是差异极显著,其余的KAP和KIF基因的相对表达量都为差异不显著。