游离脂肪酸对人血管内皮细胞促增殖抑制及诱导凋亡的作用

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目的:本研究通过细胞培养的方法,了解不同浓度,不同碳链长度和不同饱和度的脂肪酸对培养的内皮细胞凋亡及生长周期的直接影响.方法:按内皮细胞的常规培养方法,将内皮细胞分装于100ml细胞培养瓶中,每瓶加入培养基5ml,置于5%CO2,37℃二氧化碳培养箱中孵育,将培养的生长正常的ECV-304细胞用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化液消化细胞,按5X105ce11分别接种于100ml的培养瓶,及96孔板,分为C16:0、C18:0、C24:0、C18:1、C18:2及对照6组,每种脂肪酸选用4个浓度,每个浓度重复4孔,分别加入各浓度的条件培养液培养48小时,然后用流式细胞仪对细胞凋亡及周期进行检测及活细胞染色,96孔板用于MTT实验,用全自动生化分析仪进行培养液上清LDH测定.结论:1游离脂肪酸对内皮细胞有生长抑制及促凋亡的作用.2饱和脂肪酸对内皮细胞凋亡的影响较大,且呈浓度依赖性.糖尿病及有胰岛素抵抗状态的患者血管病变比普通人群升高,其血浆中饱和脂肪酸升高是内皮功能损害的部分原因.3不饱和脂肪酸C18:1、C18:2低浓度时,对内皮细胞凋亡没有影响,但高浓度对内皮细胞损伤更加明显.4游离脂肪酸对内皮细胞的作用与饱和度有关,饮食中可适当增加不饱和脂肪酸比例,但决不是越多越好,但最适宜的比例还有待进一步研究.
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