【摘 要】
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生物絮凝剂相比传统絮凝剂,具有无二次污染、用处广泛、成本低廉、高效、无毒等优势。因此,本实验研究利用秸秆纤维素的降解产物作为制备生物絮凝剂培养基,使生物絮凝剂制备成本降低,并分析、优化生物絮凝剂培养基的组成成分。这对秸秆的高附加值的资源化回收利用,以及低成本生物絮凝剂的开发与利用具有重要的理论和实际意义。本研究立足于廉价秸秆废料的资源化利用,通过实验来寻找适合的廉价培养基来代替传统的高价原料。通过
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生物絮凝剂相比传统絮凝剂,具有无二次污染、用处广泛、成本低廉、高效、无毒等优势。因此,本实验研究利用秸秆纤维素的降解产物作为制备生物絮凝剂培养基,使生物絮凝剂制备成本降低,并分析、优化生物絮凝剂培养基的组成成分。这对秸秆的高附加值的资源化回收利用,以及低成本生物絮凝剂的开发与利用具有重要的理论和实际意义。本研究立足于廉价秸秆废料的资源化利用,通过实验来寻找适合的廉价培养基来代替传统的高价原料。通过多代分离转接技术,进行CMC-Na水解圈测定和滤纸降解秸秆实验,得到5种具有明显降解纤维素能力的菌株,并构建纤维素降解复合菌剂。在30℃培养条件下,反应10d后,滤纸条变黄变薄,几乎降解完毕。通过鉴定秸秆降解菌剂的组成和群落等属性,构建所获得的菌剂,命名为Bacillus sp JF1,并进行为期30d的秸秆降解试验。通过混菌发酵,进行产絮菌的培养试验。利用纤维素降解菌,进行玉米秸秆降解预处理实验后,所降解的秸秆作为发酵底物中的主要碳源,进行秸秆发酵液的预处理;利用秸秆降解产物作为产絮菌的低成本培养基,培养产絮菌,得出产絮菌培养液(菌悬液、发酵液、上清液),并测定其还原糖浓度分别为13.73g/L、31.96g/L和44.5g/L。结果表明,产絮菌的上清液还原糖含量高于菌悬液和发酵液。产絮菌的菌悬液、发酵液和上清液的絮凝率分别为42%、70%和78%,表明菌株的胞外分泌物质产生絮凝剂。以养猪场污水作为实验样品,经过分离、筛选得到产絮菌。通过反应条件优化实验得出,产絮菌的最佳发酵时间为2d,最佳温度为35℃,发酵菌液接种量为3%。絮凝剂在80℃时反应30min,具有较高的耐热性;在90℃时反应,呈现下降的趋势。高通量分析该菌株在属水平上以杆菌为主,丰度高达95%,命名为Bacillus spA1。利用紫外光谱进行了微生物絮凝剂扫描,结果表明,该絮凝物质中不含核酸、蛋白。通过红外光谱分析发现,该絮凝剂物质主要为—OH和—NH2COCH3的酸性多糖,活性基团主要以COO—的形式存在。通过EDX元素分析发现,产絮菌A1中C、N、O、K和Ca,5种元素原子百分比分别为67.8%、6.95%、24.67%、0.06%和0.52%。
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