展青霉素（Patulin，PAT）是由某些真菌产生的一种有毒次级代谢产物，在多种食品中均有发现，苹果及其制品中尤为严重，具有急性和亚急性毒性、免疫毒性、致畸、致突变，致癌等作用。为了保证食品安全和质量，建立快速而灵敏的PAT检测方法一直备受关注。目前检测展青霉素的方法主要是薄层层析法（TLC）、高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）等物理分析检测方法，虽然它们可以精确地进行定性和定量分析，但其设备昂贵、操作复杂。基于抗原抗体高特异性反应的免疫学检测方法具有价廉、高效、灵敏、高通量等优点，特别适合于大批量样品的检测，成为真菌毒素检测方法的研究热点。但目前很少有对展青霉素免疫学检测方法的报道，这主要是由于展青霉素易与血液蛋白中的巯基和氨基反应，不能在体内稳定存在，不能产生或产生很低效价的抗体。本实验以L-阿拉伯糖为前体，经过五步化学合成反应，合成了较为稳定的展青霉素结构类似物，命名为P2，并通过核磁共振氢谱分析对该结构进行了鉴定；然后通过活泼酯法，将该半抗原与卵清蛋白（OVA）和牛血清蛋白（BSA）相偶联，分别制成了包被原P2-OVA和免疫原P2-BSA。根据展青霉素在体外较为稳定的特点，首先对展青霉素进行修饰，然后连接到载体蛋白OVA，制成了另外一种检测用的包被原P1-OVA；为建立直接ELISA的方法，将展青霉素修饰后与辣根过氧化酶连接，制成了酶标半抗原P1-HRP。将制备好的免疫原P2-BSA按照常规步骤分别免疫新西兰大白兔和BABL/C小鼠，免疫结束后测定抗血清效价。兔多克隆抗体通过取血、离心取血清并用Protein G亲和纯化柱纯化获得；小鼠单克隆抗体通过取小鼠脾脏，与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞，并进行单克隆化而得到产单一抗体的细胞系。纯化后的多克隆抗体对P1-OVA的效价为1:6400，对P2-OVA的效价为1:12800；特异性单克隆抗体，经protein G亲和层析柱纯化后，抗体对P1-OVA的效价为1:3200，对P2-OVA的效价能够达到1:6400。以制备的特异性抗体为基础，尝试用三种方法建立展青霉素的ELISA检测，其中间接竞争ELISA方法最合适。先用间接ELISA方法对反应pH、不同底物的选择、抗原抗体最佳稀释浓度、底物反应时间进行了优化，并对展青霉素在反应中的稳定性进行了测定，最终确定了展青霉素的竞争抑制曲线。另外还研究了展青霉素的胶体金免疫层析检测方法，经过优化，可定性地检测样品中的展青霉素。建立的免疫学检测方法在快速检测展青霉素中具有很大的应用潜力。