亚硒酸钠对草鱼肾脏细胞和斑点叉尾鮰卵巢细胞作用研究

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以不同浓度亚硒酸钠(Na2SeO3)体外培养斑点叉尾鮰卵巢细胞(CCO)和草鱼肾脏细胞(CIK),培养不同时间下,观察Na2SeO3对细胞形态的影响和对细胞生长及抗氧化能力的影响。并在此基础上选择合适的Na2SeO3浓度,通过滴度测定和噬斑实验,研究Na2SeO3抗病毒的作用。结果表明:Na2SeO3对CCO的作用呈浓度和时间依赖性。低浓度的Na2SeO3对细胞的形态和生长没有显著的影响,而随着Na2SeO3浓度的增加(≥5μmol/L)和作用CCO的时间的延长(≥24 h),细胞生长受到抑制,细胞形态出现损伤样变化,并随着Na2SeO3浓度的增加,抑制作用增强。Na2SeO3(≥10μmol/L)作用CCO 24h,细胞内的超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著下降,乳酸脱氢酶(LDH)漏出率显著增加,脂质过氧化水平(丙二醛,MDA)的含量显著升高,提示细胞受到严重氧化损伤。10 nmol/L的Na2SeO3对CIK的生长有显著的促进作用(P<0.05),而随着Na2SeO3浓度的增加(≥100μmol/L)和作用CIK的时间的延长(≥24 h),细胞生长受到抑制,细胞出现损伤样变化,细胞变圆,脱落,贴壁细胞数量减少。Na2SeO3浓度达到1 mmol/L时会引起CIK细胞脂质过氧化水平提高,引起氧化损伤和细胞膜损伤,同时说明与CIK相比较,CCO对Na2SeO3更敏感。1μmol/L Na2SeO3作用CCO和CIK 24 h后感染斑点叉尾鮰病毒(CCV)和草鱼呼肠孤病毒(GCRV),与对照组相比较,病毒的滴度均降低了一个数量级,而感染病毒后加入1μmol/L Na2SeO3或者将Na2SeO3与病毒作用后再感染细胞均未出现与对照组明显的差异性。以上结果都表明,1μmol/L Na2SeO3能预防病毒感染,抑制病毒的吸附作用,这可能与Na2SeO3能提高抗氧化能力来减少入侵病毒造成的损伤有关。
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