安徽省市售猪肉弓形虫感染阳性率及基因分型的研究

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目的本实验主要目的是评估人在摄入猪肉这一中国最普遍的肉制品后弓形虫传播给人的风险并确定其主要基因型。方法从安徽省四个地区的零售肉摊购买新鲜猪瘦肉样本416份,其中合肥101份,肥东100份,肥西114份,长丰101份。每个样本通过荧光定量PCR检测组织样本中弓形虫DNA及ELISA检测组织液中抗弓形虫抗体。14个组织液ELISA和荧光定量PCR同时阳性的组织接种小鼠分离虫株。最后获得1个分离株,为了观察这株的毒力,10只小鼠(6周龄)中的每只腹腔注射1000个速殖子。每日观察小鼠的死亡情况并进行记录。为了确定猪肉中分离的弓形虫基因型,对1个分离株和7个具有较高弓形虫浓度的阳性DNA样本使用9个基因位点SAG2, SAG3,BTUB, GRA6, L358, PK1, c22-8, c29-2和Apico的PCR-RFLP方法进行分型。结果在416份样本中有42份ELISA检测阳性,阳性率为10.1%;有75份荧光定量PCR检测阳性,阳性率为18.03%。14个荧光定量PCR和ELISA同时阳性的样本接种小鼠后分离到1个虫株(Tgpkfx171),腹腔接种速殖子的10只小鼠均在5-10天内死亡,提示该分离株为强毒株。在PCR-RFLP的分型结果中只有分离株和两个阳性DNA样本在所有位点具有完整数据。分离株(Tgpkfx171)属于ToxoDB#9(Chinese1基因型)。两个阳性的DNA样本(Tgpkhf2和Tgpkhf3)属于ToxoDB#213,该基因型为首次报道。其余5个阳性DNA样本只能在部分位点被分型。结论1.安徽省零售猪肉中弓形虫感染PCR阳性率为18.03%,并从新鲜猪肉中分离到活的弓形虫,提示人在摄入未熟猪肉后有感染弓形虫的风险。2.对3个样本进行9个位点基因分型发现,其基因型为ToxoDB#9(Chinese1)和ToxoDB#213,其中ToxoDB#213基因型为首次报道。3. ToxoDB#9(Chinese1)和ToxoDB#213基因型可能是这一区域猪肉中弓形虫的主要基因型。
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