转录因子AP-2α靶基因ZNF256的克隆及其功能研究

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MAPK是一族胞浆内广泛分布的蛋白激酶,包括细胞外调节蛋白激酶(Extracellular—SignalRegulatedKinaseERK)、p38—MAPK、C—junN端激酶(JNK)。在细胞的增殖、分化和生存中起着重要作用,而转录因子AP—2家族目前有五个成员被鉴定出来AP—2α、AP—2αβ、AP—2γ.AP—2δ和AP—2δ。现在研究表明,在胚胎发生时期转录因子AP—2与细胞增长、组织分化、肿瘤的形成和迁移有关。染色质免疫共沉淀技术发现AP—2α能够和ZNF256内含子DNA片段相互作用,并且电泳凝胶迁移变动分析法找到AP—2α结合位点。荧光定量PCR实验和萤光素酶实验表明AP—2α能够增强ZNF256的转录活性。萤光素酶实验证明AP—2α能够增强ZNF256对API和SRE的抑制活性。这些结果表明AP—2α能够结合基因ZNF256而且影响其转录活性。 ZNF256基因定位于19q13.43区域,全长673个氨基酸,含有典型KRAB和锌指结构域,属于C2H2型锌指蛋白,目前还没有关于该基因功能的报道。生物信息学预测ZNF256基因参与了MAPK信号通路,与此同时研究发现19q13.43区域含有一个锌指蛋白簇,该蛋白簇中的锌指蛋白大部分可以抑制AP1和SRE的转录活性。这与我们的实验结果相符ZNF256基因可以抑制AP1和SRE的转录活性并且在转录因子AP—2α存在的情况下这种抑制作用明显加强。这暗示AP—2α可能与MAPK信号通路有关,这些结果为深入研究MAPK信号通路复杂的传递机制提供了新的依据。
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