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目的1.研究雌、孕激素对内异症腺上皮细胞OPN及MMP-9表达的调节机制;2.分析OPN及MMP9与子宫内膜腺上皮细胞侵袭性的相关关系;3.探讨siRNA-OPN干扰对子宫内膜腺上皮细胞OPN/MMP-9表达及细胞侵袭性的影响。方法1.取35例Ⅳ期的子宫内膜异位症患者的在位及异位内膜,另外30例行输卵管绝育患者的在位内膜作为对照,免疫组化检测内膜中OPN及MMP-9的蛋白表达;2.将内异症腺上皮细胞进行原代分离、培养,免疫细胞化学检测细胞中OPN及MMP-9的表达情况;分别采用不同浓度的17β-雌二醇及孕酮,以及17β-雌二醇+孕酮,对腺上皮细胞进行干预,仅加入培养液组做空白对照组,RT-PCR及western-blot检测OPN及MMP-9 mRNA及蛋白的表达,穿膜实验检测各组药物干预前后细胞侵袭性的变化;3.siRNA-OPN干扰子宫内膜腺上皮细胞,western-blot检测OPN、MMP-9蛋白表达的变化;穿膜实验检测细胞侵袭性的改变;明胶酶谱法检测MMP-9酶原及MMP-9活酶的表达变化。结果1.免疫组化检测结果显示,OPN、MMP-9主要表达于子宫内膜的腺上皮细胞中,OPN、MMP-9蛋白在内异症异位内膜、在位内膜的表达均高于对照组内膜（P<0.05）;相关分析Pearson相关系数r异位内膜=0.7l1,P=0.031<0.05;r在位内膜=0.608,P=0.012<0.05,提示OPN、MMP蛋白的表达存在正相关关系;2.17β-雌二醇能够上调内异症腺上皮细胞OPN、MMP-9 mRNA及蛋白的表达,并能够使穿膜的细胞数增加,与对照组相比,差异有统计学意义（P<0.05）。孕酮能够上调内异症腺上皮细胞OPN mRNA及蛋白的表达,但与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）;孕酮能够下调MMP-9 mRNA及蛋白的表达,但与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。孕酮使穿膜的细胞数轻度下降,与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。而17β-雌二醇结合孕酮能够上调内异症腺上皮细胞OPN及MMP-9 mRNA及蛋白的表达,并使穿膜细胞数明显增加,OPN及MMP-9表达的强度及穿膜细胞数均高于单一17β-雌二醇刺激,差异有统计学意义（P<0.05）;3.siRNA-OPN干扰后,内异症腺上皮细胞MMP-9酶原及MMP-9活酶的表达均明显下调,与未处理组及无意义链RNA干扰组相比,差异有统计学意义（P<0.05）;siRNA-OPN干扰后,穿膜细胞数明显下降。结论1.OPN及MMP-9在子宫内膜异位症内膜中高表达,且二者呈正相关,OPN、MMP-9的高表达可能与内异症的发病密切相关;2.雌激素能够上调OPN及MMP-9的表达及细胞的侵袭性,可能与内异症患者内膜腺上皮细胞的迁移相关。雌激素结合孕激素能够上调OPN及MMP-9的表达及细胞的侵袭性,高于单一雌激素刺激。3.雌激素可能通过上调OPN进一步活化MMP-9,并使子宫内膜腺上皮细胞的侵袭性增强。