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第一部分：FOXE1和RASSF2基因甲基化在甲状腺乳头状癌细胞株中功能研究为了研究FOXE1和RASSF2两个基因启动子区域在甲状腺乳头状癌中甲基化状态是否异常,以及其表达水平是否受到甲基化调控,培养正常甲状腺滤泡上皮细胞株Nthy-ori-3以及三株甲状腺乳头状癌细胞株W3, IHH4, TPC1。提取DNA并做NaHSO3处理,选择FOXE1和RASSF2启动子区域进行PCR,并克隆测序。结果提示,与结果提示对比正常甲状腺滤泡上皮细胞株,在甲状腺乳头状癌细胞株中FOXE1启动子区域呈现低甲基化,FOXE1高表达状态。而RASSF2启动子区域呈现高甲基化,RASSF2低表达状态。针对以上结果,用5-aza-dC处理甲状腺乳头状癌细胞株,去除甲基化状态,检测原本启动子区域高甲基化的RASSF2基因,结果表明,RASSF2启动子区域去甲基化以后,RASSF2表达上调。以上结果表明,FOXE1和RASSF2启动子区域在甲状腺乳头状癌中都有异常甲基化状态,并且分别表现出类似癌基因和抑癌基因的作用。第二部分：FOXE1和RASSF2基因甲基化在甲状腺乳头状癌肿瘤样本中研究为了进一步研究FOXE1和RASSF2基因启动子区域在临床样本中的甲基化状态,本研究采用79例甲状腺乳头状癌标本,以及匹配的癌旁组织。针对FOXE1和RASSF2在细胞株中甲基化异常位点设计MSP引物,进行甲基化状态检测。并且结合临床特点以及BRAF突变检测,对其危险因素和甲基化状态进行分析。结果显示,FOXE1在甲状腺乳头状癌和癌旁的甲基化比率分别为5.06%和16.46%(P=0.040),在肿瘤中FOXE1mRNA表达明显高于癌旁(P<0.001)。比较临床特点发现甲基化状态和桥本氏甲状腺炎(P=0.003),T肿瘤分级(P<0.001)以及包膜是否侵犯(P<0.001)相关。在RASSF2基因在甲状腺乳头状癌和癌旁之间的甲基化率分比为53.16%和10.13%(P<0.001),在肿瘤中RASSF2表达明显低于癌旁(P<0.001),在对比分析临床特点后发现颈部VI区淋巴结转移和RASSF2甲基化状态有密切联系(P=0.004)。同时检测BRAF突变和肿瘤T分级(P=0.007),包膜外侵犯(P=0.005)有密切联系,而BRAF突变和FOXE1(P=0.051), RASSF2(P=0.447)甲基化状态都没有密切关联。结果提示,在甲状腺乳头状癌中,FOXE1和RASSF2启动子甲基化有明显异常,在甲状腺癌肿瘤形成机制中起到了重要作用。