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一、不同浓度吡格列酮对LPS诱导的兔骨关节炎作用研究目的探讨不同浓度吡格列酮(Pioglitazone)对脂多糖(LPS)诱导的兔骨关节炎(Osteoarthritis,OA)软骨细胞的作用。方法选取18只健康成年雄性新西兰大白兔,按随机数字表法分为6组,分别为正常组、LPS组、1μM组(LPS+1μM吡格列酮)、10μM组(LPS+10μM吡格列酮)、50μM组(LPS+50μM吡格列酮)、100μM组(LPS+100μM吡格列酮),每组3只大白兔。分别提取6组大白兔膝正常软骨细胞,其中LPS组、不同浓度吡格列酮组软骨细胞在含2μg/ml LPS培养基中培养4h。此后,各浓度吡格列酮组软骨细胞分别在含有1μM、10μM、50μM、100μM吡格列酮培养基中连续培养。7天后采用ELISA法检测6组膝软骨细胞白介素-4(Interleukin-4,IL-4)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、瘦素(Leptin,LEP)的水平。结果与正常组相比,100μM组吡格列酮OA软骨细胞IL-4表达较高,差异有统计学意义(P<0.05),其余各组间比较差异均无统计学意义。与1μM、10μM组相比,50μM、100μM组吡格列酮OA软骨细胞TNF-α、LEP水平下降程度更为明显。结论吡格列酮可以刺激OA软骨细胞IL-4的表达增加,起到软骨保护作用。同时可以抑制LPS诱导的OA软骨细胞TNF-α、LEP表达,减轻炎症反应。二、低强度脉冲超声与吡格列酮对兔骨关节炎软骨细胞的作用研究目的低强度脉冲超声(Low-Intensity Pulsed Ultrasound,LIPUS)和吡格列酮(Pioglitazone)经过氧化物酶增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferator-Activated Receptorsγ,PPARγ)/核转录因子-κB(Nuclear Factor Kappa B,NF-κB)/诱导型一氧化氮合酶(Inducible Nitric Oxide Synthase,i NOS)途径对骨关节炎(Osteoarthritis,OA)软骨细胞的保护作用。方法选取24只健康成年新西兰大白兔,按随机数字表法分为正常组、脂多糖(LPS)组、LIPUS组(LPS+LIPUS)、吡格列酮组(LPS+吡格列酮),每组6只大白兔。分别提取4组大白兔膝正常软骨细胞,采用ELISA法检测各组软骨细胞肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、瘦素(Leptin,LEP)、一氧化氮(Nitric Oxide,NO)的水平;采用免疫细胞化学和免疫荧光染色法检测4组软骨细胞Ⅱ型胶原(TypeⅡCollagen,COL2)的表达情况;另采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫蛋白印迹法(Western blot)技术分别检测4组软骨细胞PPARγ,NF-κB,i NOS m RNA和蛋白表达水平。结果1.LIPUS和吡格列酮均可下调OA软骨细胞TNF-α、LEP、NO的水平,而吡格列酮组下调幅度大于LIPUS组,差异有统计学意义(P<0.05)。2.LIPUS组OA软骨细胞COL2的表达水平显著上调,与LPS组比较,差异有统计学意义(P<0.05),而吡格列酮无此作用。3.LIPUS组和吡格列酮组OA软骨细胞PPARγ的m RNA和蛋白表达水平均高于LPS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。4.LIPUS组和吡格列酮组OA软骨细胞NF-κB、i NOS m RNA和蛋白表达下降,与LPS组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且吡格列酮组下降程度大于LIPUS组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论LIPUS可促进软骨基质生成的作用,而吡格列酮抗炎症作用更为明显;两者可能通过PPARγ/NF-κB/i NOS途径参与OA软骨细胞的抗炎症、COL2合成过程,产生对OA软骨细胞保护作用。