大豆胞囊线虫孵化特性与滞育机理研究

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2006年和2007年对田间自然条件下大豆胞囊线虫(4号生理小种)在大豆根部的时空动态分布,大豆胞囊线虫滞育终止和诱导的温度效应,线虫季节孵化动力学及卵内代谢物质进行了系统的研究,并对白色胞囊和褐色胞囊的孵化特性及代谢物质进行比较。研究结果如下:1.大豆根内大豆胞囊线虫时空动态分布大豆胞囊线虫分布与根系生长状况关系密切。随着根系生长发育,单位根长线虫数以及线虫总数增多,单位根长内线虫数量呈S型曲线变化,其中J2为优势群体,其次是J3和J4。随着出苗天数的增加,主根和侧根内线虫数量变化呈相反趋势,其中主根内线虫密度减少,侧根内线虫密度增加至相对稳定值。随着土层的增加,主根和侧根内线虫密度差异减小,大豆胞囊线虫主要分布在5~15 cm土层。2.大豆胞囊线虫季节孵化动力学大豆胞囊线虫孵化率受胞囊形成时间、大豆物候期以及温度共同影响。3月温度增高,胞囊孵化率增加;大豆生长前期和中期,新形成的大豆胞囊线虫孵化率高;生长后期,孵化率显著降低;休闲季节大豆胞囊线虫孵化率很低。3.温度对大豆胞囊线虫滞育终止的影响低温可以打破休眠,但需一定时间,即休眠打破有个时间临界值,超过这一时间可能会再次进入滞育状态;适宜温度也可打破休眠,但是进入低温则又恢复滞育状态。4.温度对大豆胞囊线虫滞育诱导的影响35℃、温周期CT12:12(14℃: 35℃)引起大部分大豆胞囊线虫滞育;14℃诱导小部分卵滞育。温周期CT12:12(14℃: 28℃)处理打破部分卵的滞育。5.白色胞囊和褐色胞囊的比较研究白色胞囊和褐色胞囊均有部分幼虫孵出,且白色胞囊内卵的孵化率明显比褐色胞囊的高。褐色胞囊内的糖原、蛋白质含量较低,酯酶活性较小,但是总糖、海藻糖含量及海藻糖酶活性较高,说明褐色胞囊内卵的滞育率较高,其代谢物质中海藻糖和糖原之间可能存在活跃的相互转化。SDS-PAGE蛋白图谱中白色胞囊和褐色胞囊的谱带分别为15和10条,白色胞囊比褐色胞囊多116.6、79.1、68.2、64.3和60.5 KDa等5条谱带;酯酶电泳图谱中白色胞囊和褐色胞囊的谱带分别为3和6条,褐色胞囊比白色胞囊多EST0.63、EST0.75、EST0.81等3条谱带。说明新形成的白色胞囊中蛋白质含量较高,在胞囊褐化的过程中,蛋白质含量下降,酯酶同工酶的活性增强。褐色胞囊内卵的孵化率低可能与这些物质变化相关。6.代谢物质与大豆胞囊线虫滞育的关系总糖含量与卵的滞育率以及温度的综合影响。海藻糖和甘油含量与线虫的滞育和温度相关。二者含量均与线虫滞育呈相同趋势;与温度的变化趋势相反。甘油含量呈现一定的季节变化,春季和夏初卵内甘油含量相对较低,甘油绝对含量并不能反映卵的滞育率。卵内可溶性蛋白和糖原含量受温度、大豆物候期和线虫滞育的影响。休闲季节线虫滞育率高,可溶性蛋白、糖原含量低;在大豆生长季节,线虫滞育率低,可溶性蛋白、糖原含量高。滞育终止和诱导试验发现低温可能是引起蛋白质含量增加的一个重要原因。高温有利于糖原的积累,低温线虫消耗糖原转化为海藻糖,因而糖原含量下降。胞囊内卵滞育率与酯酶活性变化呈相同趋势。海藻糖酶活性受到海藻糖浓度以及卵滞育的综合影响,2006年12月至2007年10月卵内海藻糖酶活性变化模式为:高→低→高→低→高。不同季节不同时期的胞囊内酯酶同工酶在活性以及谱带上均有较大差异。因此,利用酯酶同工酶鉴定生理小种需建立共有同工酶谱系,以更精确的区分小种;另外需选择同一时期发育一致的胞囊。
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