S100A13在甲状腺癌组织中的表达及对TPC-1细胞凋亡影响的研究

来源 :南华大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:junjian1127
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目的:研究S100A13在甲状腺癌组织中的表达差异。探讨S100A13基因沉默及过表达对甲状腺癌TPC-1细胞凋亡的影响。方法:运用组织芯片技术研究S100A13在甲状腺癌及甲状腺正常组织中的表达情况。设计2条S100A13小分子干扰RNA(siRNA1和siRNA2),筛选出有沉默效果的siRNA2。利用瞬时转染技术改变S100A13在TPC-1细胞中的表达,采用RT-PCR检测TPC-1细胞中S100A13mRNA的表达水平,流式细胞术探讨S100A13基因沉默及过表达对TPC-1细胞凋亡的影响。结果:1.组织芯片免疫组化结果显示:S100A13在甲状腺癌组织中表达明显高于甲状腺正常组织(P<0.01)。2.S100A13-siRNA2取50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L分别转染TPC-1细胞,结果显示:与ScrambleRNA(阴性对照)相比,200nmol/L时可使S100A13mRNA表达降低(P<0.05),浓度为50nmol/L,100nmol/L时表达无明显差异(P>0.05)。S100A13-siRNA2200nmol/L转染TPC-1细胞,分别于12h、24h、48h提取RNA,时效结果显示:随转染时间延长,S100A13mRNA沉默效果越显著(P<0.05)。3.pcDNA3.2/V5/S100A13(S100A13表达质粒)取1.5μg、3μg、6μg分别转染TPC-1细胞,结果显示:与pcDNA3.2/V5(空质粒)相比,转染S100A13表达质粒细胞的S100A13mRNA水平明显增高(P<0.05),但pcDNA3.2/V5/S100A13各组间S100A13mRNA表达无明显差异(P>0.05)。1.5μgpcDNA3.2/V5/S100A13转染TPC-1细胞,分别于12h、24h、48h提取RNA,结果显示:转染24h时S100A13mRNA水平最高。4.流式结果显示:S100A13-siRNA2转染TPC-1细胞,与ScrambleRNA转染细胞组相比,凋亡率增加(P<0.05)。pcDNA3.2/V5/S100A13转染TPC-1细胞,与pcDNA3.2/V5组相比,凋亡率下降(P<0.05)。结论:1.S100A13在甲状腺癌组织中表达显著高于甲状腺正常组织。2.成功设计能有效降低TPC-1细胞S100A13mRNA水平的siRNA。S100A13对TPC-1细胞凋亡可能起抑制作用。
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