肌间脂肪含量与大理石花纹的形成密切相关,是评价羊肉品质的重要指标。动物脂肪组织沉积受品种、年龄、遗传因素及营养水平等的影响。本团队前期研究发现,饲粮蛋白质水平与绵羊的脂肪沉积存在相关性。但影响绵羊肌间脂肪沉积的调控机制尚未被阐明。因此,羊肉品质营养调控技术及其调控机理已成为我国肉羊产业发展亟需解决的科学问题。本研究以36只萨湖F1代羔羊为研究对象,随机分为3组,每组12只,分别饲喂三种不同蛋白水平饲粮:标准组（10.38 MJ/kg,14.36%,Con组）、低蛋白组（10.30 MJ/kg,11.48%,LP组）和高蛋白组（10.30 MJ/kg,17.25%,HP组）。预试期8d,正试期70d,在正试期第63d至70d期间,进行为期7d的消化代谢试验。饲养试验结束后,每组随机选取3只羊进行屠宰取样。旨在运用RNA-seq技术探究饲粮蛋白质水平对绵羊肌间脂肪沉积的影响,并在绵羊前体脂肪细胞上对筛选出来的候选基因进行验证,以期揭示饲粮蛋白质水平影响绵羊肌间脂肪沉积的可能作用机制,为营养调控绵羊肌间脂肪沉积提供依据和理论参考。结果如下:1.饲粮蛋白质水平为14.36%时,绵羊的营养物质消化率、氮沉积以及能量消化代谢参数较为理想,与17.25%蛋白水平相比,可显著降低氮的排放（P＜0.05）,提高绵羊对饲粮蛋白质的利用率。2.绵羊肌间脂肪组织转录组测序,发现HP组和Con组存在2014个差异基因,HP组和LP组存在1506个差异基因,LP组和Con组存在714个差异基因;结合GO分析和KEGG Pathway富集分析,筛选出6个影响绵羊肌间脂肪沉积的候选基因:CPT1B、PPARA、ACACB、ADCY2、PRKAG3和PGAM2。3.对筛选出的候选基因CPT1B进行功能验证,过表达CPT1B可促进绵羊前体脂肪细胞脂质合成;通过双荧光素酶报告试验验证了CPT1B基因是miR-27a的直接靶基因;探究了miR-27a在脂肪细胞脂质合成的作用,过表达miR-27a显著抑制了绵羊前体脂肪细胞中脂质合成（P＜0.05）,而抑制miR-27a表达则显著促进了绵羊前体脂肪细胞中脂质合成（P＜0.05）。表明,miR-27a可以靶向CPT1B基因调控绵羊前体脂肪细胞脂质合成。综上所述,本研究条件下,饲粮蛋白水平为14.36%时,绵羊肌间脂肪沉积效果最佳,绵羊对饲粮蛋白质利用率最高;筛选出6个影响绵羊肌间脂肪沉积的关键基因,分别为CPT1B、PPARA、ACACB、ADCY2、PRKAG3和PGAM2;miR-27a可通过靶向CPT1B基因调控绵羊前体脂肪细胞脂质合成。本研究结果为揭示饲粮蛋白质调控绵羊肌间脂肪沉积的分子机制提供了理论依据。