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番茄灰霉病是保护地番茄生产上的重要病害之一,经常可以造成大棚蔬菜特别是番茄的毁灭性危害,由于该病菌很容易产生抗药性,所以化学农药很难防治,而且造成长期大量使用化学农药,使该病害的3R更加突出。本研究旨在从陕西杨凌保护地番茄土壤中分离筛选出对番茄灰霉病菌具有强烈拮抗作用的放线菌,并对菌株进行鉴定、发酵条件优化,对其产生的抑菌机理进行初步研究,以期研究出对番茄灰霉病具有良好防治效果的微生物农药新资源。本试验从采集的20个土样中共分离到2170余株放线菌,以番茄灰霉病病菌、烟草赤星病菌、小麦全蚀病菌、水稻纹枯病菌、小麦根腐病菌、西瓜枯萎病菌等6种病菌为靶标菌经皿内十字交叉法进行初筛,初步筛选出具有一定拮抗作用的原始菌株13株,再通过复筛得到6株拮抗效果较好的菌株,其中WB532菌株具有良好的拮抗活性和稳定性,对其进行单孢分离并测定单孢拮抗效果,获得活性最强的单孢分离菌株WB532-7,对番茄灰霉病菌的抑制率分别达到91.75%。最终确定WB532-7为最优菌株。参照链霉菌分类鉴定相关文献,对采用不同培养基培养WB532-7菌株,观察菌落培养特征、菌体形态学特征以及生理生化特征,WB532-7菌落淡紫色至灰色,孢子丝螺旋形,孢子椭圆形,菌株明胶液化,牛奶先凝固后胨化,纤维素不生长等,根据上述特征初步鉴定WB532-7菌株属于链霉菌属的淡紫灰色类群(S . Lavendulae)。通过对液体发酵条件的优化实验,优化后培养基配方组成为黄豆粉2%,葡萄糖1%,淀粉1.5%,碳酸钙0.25%,磷酸氢二钾0.05%,并发现在初始发酵培养基pH8.0,发酵温度30℃,摇瓶转速150 r/min的条件下发酵72h,菌株WB532-7的菌体代谢最旺盛,抑菌效果最好。本研究对WB532-7菌株的抑菌机理进行了初步探索,发现WB532-7菌株能强烈抑制病原真菌菌丝的生长和孢子的萌发。显微观察到被WB532-7抑制的病原真菌菌丝大部分扭曲、肿大、畸形,分枝增多,原生质外溢,出现膨大的泡囊;用WB532-7发酵液处理后,病原真菌的孢子萌发率低,芽管或孢子畸形,发酵液50x稀释液对番茄灰霉病菌孢子萌发抑制率41%。盆栽生测实验结果表明,WB532-7发酵液对番茄灰霉病具有良好的预防和治疗作用,分别可达83.87%和79.58%;并对番茄植株具有一定的促生作用,与对照相比株高增幅达29.65%,促生效果均保持20%以上。大棚田间试验结果显示WB532-7发酵液50x稀释液对番茄灰霉病的防治效果可达65.16%,其效果低于50%速克灵WP1500x倍液的防效69.04%而优于对照药剂4%农抗-120水剂300x液的防效59.55%,并表现出良好的稳定性和持久性。