论文部分内容阅读
目的VHL基因定位于染色体3p25-26,是一个抑癌基因,其功能和表达的变化与嗜铬细胞瘤的发生有一定关系,且已证实散发嗜铬细胞瘤中存在VHL基因的突变。本实验的目的是通过对散发嗜铬细胞瘤及正常肾上腺髓质中VHLmRNA及pVHL的研究,探索VHLmRNA和pVHL表达的变化与嗜铬细胞瘤发病的相关性；同时探讨pVHL与下游调控基因表达的关系,进而探讨其临床意义。方法收集兰州军区兰州总医院全军泌尿外科中心2007年7月至2009年6月间手术治疗的散发嗜铬细胞瘤标本40例,所有肿瘤组织标本均为手术中无菌采集的新鲜标本,术前均未行放疗和化疗。另外收集意外死亡的健康成人正常肾上腺髓质标本20例作为对照。所有标本均经病理证实。(1)应用免疫组织化学方法分析散发嗜铬细胞瘤及正常肾上腺髓质中pVHL的表达；(2)通过原位杂交方法,检测散发嗜铬细胞瘤及正常肾上腺髓质中VHL基因mRNA的表达；(3)对比不同组织固定液对组织抗原保护的效果。结果(1)pVHL在散发性嗜铬细胞瘤中的表达和正常肾上腺髓质中的表达(P=0.502>0.05), pVHL在二者中的表达无明显差异；HIF-1α和HIF-2α在散发性嗜铬细胞瘤中的表达明显高于正常肾上腺髓质中的表达(P=0.012<0.05)；嗜铬细胞瘤组织中pVHL与HIF-1α和HIF-2α表达程度呈呈负相关。HIF-1α和HIF-2α表达的相关性分析结果提示二者无明显相关。(2) VHLmRNA在散发性嗜铬细胞瘤中的表达和正常肾上腺髓质中的表达(P=0.007<0.05), VHLmRNA在二者中表达差异显著；散发嗜铬细胞瘤组织中pVHL与VHLmRNA (rVHLmRNA=0.752, P<0.01)表达程度呈正相关；正常肾上腺髓质中组织中pVHL与VHLmRNA (rVHLmRNA=0.752, P<0.01)表达程度呈正相关,差异均有统计学意义。(3)4%多聚甲醛的抗原保护效果与10%甲醛的抗原保护效果相比,P＜0.05,差异有统计学意义。结论(1)散发嗜铬细胞瘤中pVHL与HIF-α存在相关性,这在嗜铬细胞瘤发生发展中有重要意义；(2)正常肾上腺及散发嗜铬细胞瘤中pVHL与VHLmRNA表达程度正相关；(3)4%多聚甲醛的抗原保护效果明显优于10%甲醛的抗原保护效果。