LRIGx/RIGb的辐射诱导表达调控和对细胞增殖影响的研究

来源 :中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mxqfeng
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辐射诱导基因LRIGx(low dose radiation-induced gene)是本实验室用mRNA差异显示技术从人胚肺HEL细胞中发现的一个新的辐射诱导表达基因。经cDNA克隆鉴定及生物信息学分析,确认该基因定位于人染色体20q11.2-12。 前期研究工作表明,受到0.2Gy γ射线照射后2~4h,人A549细胞中该基因mRNA表达水平显著上调;当照射剂量增加到2Gy时,其诱导表达水平明显低于0.2Gy照射。通过细胞周期同步化,观察到LRIGx mRNA表达高峰在G2/M期。 最近,英国的科研人员在寻找SWI2/SNF2基因相关新的家族成员过程中,也发现了该基因,起先将之命名为CHD5(chromodomain-helicase-DNA binding-5)(后更改为CHD6),研究成果发表在Mammalian Genome杂志上。本实验室首次发现LRIGx/CHD6基因至少含3个转录本,本论文在针对其中一个转录本RIGb(~1.8kb cDNA)开展对该基因功能的研究,取得了如下进展: (1) 进一步在Hela细胞中检测RIGb的辐射诱导表达特点,实验结果表明该基因受0.5Gy γ射线诱导表达的变化最明显,且表达水平随诱导时间而有显著的变化;4Gy剂量照射对其表达无明显的影响;当照射剂量增加到20Gy时,该基因的表达又可被诱导。 (2) 比较RIGb在正常人组织之中的表达差异性,发现该基因在心脏、肝脏和睾丸中表达量特别高,在脾脏和肌肉中有中等程度的表达,而在肺、胃和肾脏中的表达量却很低。 (3) 建立了稳定表达RIGb正义和反义核酸的细胞模型,以此研究了提高或抑制RIGb基因表达后细胞增殖能力的变化。实验结果显示,RIGb表达上调使细胞的G1期进程延长,并诱导Hela细胞产生生长的接触抑制性;而其表达下调早期能够提高S期和G2/M期细胞的比例。此结果首次提示RIGb可能具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。 (4) 为阐明RIGb基因编码蛋白对细胞周期和细胞生长影响的细胞生物学和乙石甘G为火力弓b的辐射诱导表达调控和对细胞增殖影响的研究中文摘要分子生物学机制,分别构建了绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体和血凝素(HA)融合表达载体,为进一步观察该基因编码蛋白的亚细胞定位和寻找与其相互作用的蛋白奠定了基础。
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