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本试验以20个番茄品种或材料为试材,研究了过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)酶液提取及反应适宜条件;应用POD同工酶对20个番茄材料进行亲缘关系的鉴定;对20份材料苗期室内接种ToMV后进行抗病性鉴定以及接种两周后所有材料POD、PPO、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性变化的研究,得出以下结论: 1.抗性分类:根据品种背景资料介绍和室内接种鉴定分析,可初步将所有参试材料抗性分为三类:① 抗病品种:中杂9号、早红宝、W262-4、黄化黄叶番茄、黄圣果和美国番茄:② 耐病品种:美味樱桃番茄、加州大红1号、川杂-10和Oh-2-2-11;③ 感病品种:L-402、今科红玫、大红番茄合作903、加州大红4号、改良美国903、宝岛巨星、宝大903番茄、W262、Oh-2-2-6和金刚2号大番茄。 2.氧化酶活性与抗病性关系:所有材料接种株的POD、PPO和PAL的活性均比未接种对照株的高,POD的酶活性增加倍数与抗病性呈正相关;PPO的酶活性增加倍数与抗病性呈负相关;PAL的酶活性变化与抗病性无必然联系。 3.POD和PPO同工酶与抗病性关系:接种后所有材料的POD和PPO同工酶谱带染色的深浅及谱带宽度都发生了变化,抗性品种比感病品种多出现1~3条新的POD同工酶谱带;感病品种比抗性品种多出现1~2条PPO同工酶谱带。 4.不同浓度分离胶分离效果:POD、PPO同工酶皆以10%的分离胶分离效果最好,得到的酶带最清晰,有利于进行相关分析。 5.亲缘关系:番茄属20份材料的遗传相似系数在0.54~1.00,当取相似系数为0.83时,可以将它们分为4大类。 6.最佳反应条件:(1) POD和PPO酶液提取及反应的最佳磷酸缓冲液的pH为6.0;(2) 10℃以下时PPO反应的最适时间为10min;(3) 以儿茶酚为底物,PPO在398nm波长下有最大吸光值。 综合各分析结果,接种ToMV后,不同抗性的番茄品种的PPO、POD活性及其同工酶变化具有明显的趋势,可以将其作为抗病育种苗期鉴定的重要生化指标。