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实验目的:本论文旨在采用正交试验方法优化蒙药地梢瓜的不同溶剂提取工艺,体外评价提取物的抗氧化活性,并对其中的部分药物单体进行分离、纯化与鉴定。实验方法:通过单因素实验和正交设计,以总黄酮含量为指标,考察不同溶剂(水、乙醇)、溶剂浓度、提取时间、液料比和浸泡时间因素对地梢瓜提取效果的影响,优化提取工艺。通过地梢瓜提取物清除DPPH自由基的能力及对·OH、H2O2诱导的DNA氧化损伤的保护作用研究其体外抗氧化活性。先后以乙醇和水为溶剂,加热回流法提取,浓缩得到浸膏。将浸膏复溶于蒸馏水,使用石油醚、正丁醇及二氯甲烷依次萃取,并浓缩收集得到4个部位。依据高效液相图谱显示,对二氯甲烷部位和正丁醇部位,以大孔树脂、硅胶柱色谱、聚酰胺色谱硅胶制备板、HPLC等进行分离,得到单体化合物。通过MS、1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR等波谱学方法鉴定化合物结构。实验结果:水提工艺实验中,总黄酮提取率影响因素为液料比>浸泡时间>提取时间,最佳提取条件为提取时间2h、液料比30:1、浸泡时间2h;醇提实验中,总黄酮提取率影响因素为乙醇浓度>液料比>浸泡时间>提取时间,最佳提取条件为乙醇浓度60%、料液比1:30、浸泡时间2h、提取时间1.5h。地梢瓜水提物和醇提物对于清除DPPH自由基的IC50值分别为0.3449 mg/ml和0.2472 mg/ml,对·OH、H2O2损伤的DNA双链结构有修复功能而使检测的荧光强度增强,醇提物的抗氧化活性强于水提物,且抗氧化能力与提取物浓度呈正相关。分离得到1 1种化合物,鉴定了其中6种,分别为地梢瓜苷(化合物Ⅰ)、金丝桃苷(化合物Ⅱ)、二氢槲皮素(化合物Ⅲ)、槲皮素(化合物Ⅳ)、柽柳素3-O-β-D-半乳糖苷(化合物Ⅴ)、腺苷(化合物Ⅵ)实验结论:1.成功建立了实验室级蒙药地梢瓜水提、醇提制备工艺,其水提物与醇提物均可以在体外具有良好的清除自由基活性功能,其中醇提物抗氧化作用优于水提物。2.成功从地梢瓜中分离得到黄酮类(二氢槲皮素、槲皮素);黄酮苷(地梢瓜苷、金丝桃苷和柽柳素3-O-β-D-半乳糖苷)以及腺苷。其中金丝桃苷、二氢槲皮素和腺苷单体为本植物首次发现。